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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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产品简介:
革兰氏染色法是丹麦医生Christain Gram于1884年所发明,是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,亦是一种复染法。通过此法染色可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它脱色。
在同样染色环境中利用细菌不同的等电点(Gram阳性细菌等电点为pH2.0~3.0,Gram阴性细菌等电点为pH4.0~5.0),阳性细菌带的负电荷比阴性细菌带的负电荷多,与带正电荷的碱性染料如结晶紫结合较牢,再加入媒染剂(碘)进入菌体后,与染料结合形成不溶于水的结晶紫-碘-蛋白复合物,并与阳性菌菌体内的核糖核酸镁盐结合,使已着色的细菌不易脱色。
而分化剂不易透过阳性菌的细胞壁,故阳性菌不易退色;但分化剂容易进入阴性菌菌体内,溶解染料和碘复合物,使阴性菌脱色。
Conn改良Weigert革兰染色液是在经典的革兰染色配方进行改进,使用胭脂红染色液,该法也是在草酸铵结晶紫法演化过来的。临床标本直接涂片,背景干净,胞内吞噬体清晰易辨认,细菌染色特征典型。可以区分Gram阳性细菌和阴性细菌,尤其适用于鉴别细菌和非细菌的蓝色微颗粒状物质(如钙盐)。
conn改良Weigert革兰染色液
注意事项:
切片在胭脂红染色液中染色后不用水洗,直接滴入酸性乙醇进行分化并固定着染胭脂红的颜色。
用二溶液分化时,可轻轻摇动切片使分化均匀。如分化慢时可更换新的二。至切片无紫色脱出,立即倾去二,滴入新的二冲洗。
经二冲洗后,应在镜下观察。如分化不足,可再滴入二继续分化,至Gram阳性菌清晰为止,但注意不要分化过度。
后用二反复洗涤切片,把彻底清除。切片若残留少量,以后就容易褪色。
Gram染色阳性的细菌必须具有未受损的细菌壁,如细菌壁受破损,则染色呈阴性。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验)弹性纤维的染色方法 1.Weigert氏雷锁辛品红法(1898)(Weigerts resorcin-fuchsin method)试剂的配制: Wergert氏雷锁辛品红液: 碱性品红 2g 雷锁辛 4g 蒸馏水 200ml 30%三氯化铁 25ml 取500ml的烧瓶加入蒸馏水和雷锁辛,用玻棒搅拌均匀,加热直至沸腾,持续1-2min,再加入30%的三氯化铁水溶液继续搅拌直至煮沸2-3min后,此时溶液的颜色变为紫罗蓝色,冷却后过滤。倒去滤液,将滤纸
物。 (二)弹性纤维的染色方法 1.Weigert氏雷锁辛品红法(1898)(Weigerts resorcin-fuchsin method) 试剂 的配制: Wergert氏雷锁辛品红液: 碱性品红 2g 雷锁辛 4g 蒸馏水 200ml 30%三氯化铁 25ml 取500ml的烧瓶加入蒸馏水和雷锁辛,用玻棒搅拌均匀,加热直至沸腾,持续1-2
(2)在Weigert铁苏素中染6min。 (3)自来水洗。 (4)在A染液中染5min。 (5)流水中洗。 (6)在B染液中染1~5min。 (7)在1%醋酸中分色2min。 (8)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 [结果] 胶原纤维、网状纤维和基膜深绿色;粘液深绿色,上皮细胞胞质棕色,肌肉浅绿色,红细胞红色。 7. Petersen 酸性茜蓝改良法 [显示目的] 胶原与网状组织、骨铬肌、心肌横纹、心肌间板。 [固定] Zenker液,Helly液、Bouin液
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