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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
100ml
自备材料:
胰蛋白酶
离心机
PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
胎牛血清
注意事项:
1、制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4、常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验在提取血中DNA时,细胞裂解液是指?平常的细胞裂解液,还是白细胞或者红细胞的裂解液? 看你这个词是出现在哪的。 如果你提取全血中的DNA,细胞裂解液往往指细细胞裂解液,一般就是氯化胺(NH4)Cl了 目的就是破坏红细胞的渗透膜。然后离心后就能获得比较纯的白细胞了。 接下去提DNA,一般都用kit吧,kit中还会有裂解剂,用于裂解细胞,并且这个裂解剂还带有蛋白酶K,用于DNA和组蛋白的分离。然后就是binding buffer
降解测序。 五、注意事项 细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或 Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2% SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的 cocktailer。 使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。 使用对照抗体: ① 单克隆抗体:正常小鼠的 IgG 或另一类单抗 ② 兔多克隆抗体:正常兔
相关专题 Thermo Scientific Pierce近日推出了HiPPR去垢剂去除离心柱/离心板,可更快更彻底地从细胞裂解液及其他生物样品中去除去垢剂。这种即用型的产品适用于低浓度的蛋白及多肽样品。HiPPR树脂结合并去除去垢剂,同时很好地回收蛋白及多肽,便于下游的质谱分析。 大家都知道,去垢剂和表面活性剂是制备蛋白和多肽样品时常常使用的成分。然而,它们也会干扰下游的ELISA、等电聚焦和质谱分析。请
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