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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 库存:
大量
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100ml
注意事项:
为了能使抗体可以反复多次使用,建议尽量在4℃进行一抗和蛋白膜的结合反应,以减缓一抗的衰减速度。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤(仅供参考):
参考所用的一抗的说明书,以及样品中目的蛋白的含量,按照适当比例,例如1:1000~1:500稀释一抗。
一抗稀释后即可直接用于免疫染色。
一次免疫染色结束后,可以回收稀释的一抗,4℃保存,以用于下次的免疫染色。
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文献和实验1.抗体贮存 获得新抗体后,应先根据生产厂家提供的抗体效价,将其分装,可每10μl或100μl/支分装入安瓿或0.25ml带盖塑料管中,密封。放入-20。C~40。C冰箱中保存备用,一般可保存1~2年。小量分装的抗体可1次用完,避免反复冻融而影响效价的降低。一般用前新鲜配制使用液体,稀释的抗体不能长时间保存,在4。C可存入1~3天,超过7天效价显著降低。 2.抗体使用液的配制 这是任何免疫细胞化学方法中最重要的一环,无论是一抗、二抗和各种标记抗体,用前都必须按不同免疫染色
重要。1.转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4.转膜缓冲液中甲醇比例(v/v)(三)一抗使用*使用IRS1(150kDa)、pPERK(125kDa)和内质网应激XBP1(29/55kDa)抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响(IRS1,pPERK和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带,因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键)。1.一抗稀释溶剂2.一抗稀释比例3.一抗孵育时间(四)二抗使用*高浓度的二抗会导致大量非特异性结合,造成WB背景较深。1.二抗稀释比例 (洗释
免疫组织化学抗体的稀释度、滴加与操存 《一》实验计划 每次实验前应列出详细实验计划,其中包括实验目的、拟用方法、所用一抗和二抗的种类和效价、预实施的操作流程方案以及预期实验结果等。实验分组编号用玻璃笔标记在玻片上,对每一抗体均应配以阳性和阴性对照。 《二》抗体的稀释度 抗体 稀释度,即抗体浓度。组织中抗原的免疫染色是通过适宜的抗体溶液系统而得以定性和定位,因而抗原与抗体浓度的比例十分重要。最佳的抗体稀释度可提高染色质量,与周围组织或细胞形成良好的染色
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