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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
科研
- 品系:
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- 组织来源:
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
CHO
CHO(中国仓鼠卵巢细胞) 带证书细胞简介
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二、细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培养液,悬浮细胞需离心处理,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
三、细胞培养步骤
- 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中,加入约6ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心5分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
注意:
我细胞库认为购买细胞的客户有培养细胞的经验,客户收到细胞后,严格按照本细胞培养条件更换完全培养基。如果因为客户缺少基本的细胞培养知识或培养条件而导致细胞各类问题,我库概不负责。对于因缺少细胞培养知识和时间,建议客户可联系我细胞库代为培养细胞和后续相关实验。
| T84 | 人结肠癌细胞 |
| THP1 | 人单核细胞型淋巴瘤 |
| U-2 OS | 人骨肉瘤细胞 |
| U251 | 人神经胶质细胞瘤 |
| U-937 | 人淋巴瘤细胞 |
| 3T3 swiss | swiss鼠胚胎成纤维细胞 |
| 3T3L1 | 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) |
| 3T6swiss | 小鼠胚胎成纤维细胞 |
| BA/F3 | 小鼠原B细胞 |
| BHK-21 | 金黄地鼠肾 |
| BS-C-1 | 非注洲绿猴肾 |
| C2C12 | 小鼠成肌细胞 |
| C3H 10T1/2 2A6 | 小鼠成纤维细胞 |
| CHOdhfr | 二氢叶酸缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 |
| CHO-K1 | 中国仓鼠卵巢细胞 |
| COS-1 | 非洲绿肾 |
| COS-7 | 非洲绿猴肾细胞 |
| CV-1 | 猴肾细胞 |
| IAR20 | 小鼠肝细胞 |
| IEC-6 | 大鼠小肠隐窝上皮细胞 |
| LL-PK1, | 猪肾细胞 |
| MC3T3-E1 | 小鼠胚胎成骨细胞 |
| MDCK | 狗肾细胞 |
| MEF | 小鼠胚胎成纤维细胞 |
| NIH3T3 | 小鼠胚胎成纤维细胞 |
| P815 | 小鼠肥大细胞 |
| PA12 | 小鼠成纤维细胞 |
| RTE | 大鼠气管上皮细胞 |
| SF9 | 昆虫卵巢细胞 |
| SMC | 兔主动脉平滑肌细胞 |
| CHO(中国仓鼠卵巢细胞) 带证书 |
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文献和实验液终止消化。吹打下细胞,按所需稀释比例传代。我现在的CHO细胞状态不是很好,但是疯长,不知道为什么。所以每次传代时,我都是留一滴足够,差不多能稀释20倍了。
1、CHO细胞 CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary),该细胞具有不死性,可以传代百代以上,是目前生物工程上广泛使用的细胞。全世界批准正式应用于人类疾病治疗或疾病预防的基因工程产品约有三十多种,其中只有一种(乙肝疫苗)是由酵母菌生产的,其余所有产品都是由CHO细胞和大肠杆菌生产的,大肠杆菌不能形成有活性的二聚体(如白介素2),也不具有糖基化的功能(如EPO),而CHO却具有如上的功能,因此CHO成为表达复杂生物大分子的理想宿主。另外CH0细胞在基因工程使用中
分子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功的一类细胞。本文就CHO细胞表达系统在疫苗研制中的应用做一综述。1、CHO细胞表达体系及其特点 CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生长。也可以悬浮生长。目前常用的CHO细胞包括原始CHO和二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型(DHFR-)突变株CHO。近年来,为降低
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