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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
科研
- 品系:
详情请咨询我司客服
- 组织来源:
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
详情请咨询我司客服
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
WISH
WISH(羊膜细胞) 带证书细胞简介
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二、细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培养液,悬浮细胞需离心处理,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
三、细胞培养步骤
- 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中,加入约6ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心5分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
注意:
我细胞库认为购买细胞的客户有培养细胞的经验,客户收到细胞后,严格按照本细胞培养条件更换完全培养基。如果因为客户缺少基本的细胞培养知识或培养条件而导致细胞各类问题,我库概不负责。对于因缺少细胞培养知识和时间,建议客户可联系我细胞库代为培养细胞和后续相关实验。
| PT-67(病毒转染小鼠细胞) |
| HEL(红白血病细胞) |
| 293(转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞) |
| C6(脑胶质瘤细胞) |
| SHZ-88(大鼠乳腺癌细胞) |
| CBRH-7919(大鼠肝癌细胞) |
| NCL-H460(非小细胞肺癌) |
| F9(畸胎瘤细胞) |
| 5637(人膀胱癌细胞) |
| A549(人肺腺癌细胞) |
| MCF-7(人乳腺癌细胞) |
| B16(小鼠黑色素瘤细胞) |
| HCC1428(人乳腺癌细胞) |
| A-704(人肾癌细胞) |
| NCI-H1755 [H1755](人肺癌细胞) |
| SK-HEP-1(人肝癌细胞) |
| NCI-H838 [H838](人肺癌细胞) |
| SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌细胞) |
| HPAC(人胰腺癌细胞) |
| PC-3(人前列腺癌细胞) |
| SW 1088[SW-1088; SW1088](人脑星型胶质瘤细胞) |
| EB-3 [EB3](人淋巴样Burkitt淋巴瘤细胞) |
| WISH(羊膜细胞) 带证书 |
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文献和实验wish细胞是上皮细胞, 人羊膜细胞 ,培养基我用的是最常见的1640(10%小牛血清,加双抗)。1、细胞长满培养瓶时既要传代。我用胰酶和edta的混合液消化。用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶。edta的终浓度是0.02%。2、使用前37度预热,每个25ml培养瓶加9滴的胰酶和edta混合液,消化液的量可根据自己培养瓶的大小而定,原则就是能够盖满瓶底。加入胰酶和edta混合液以后,为使酶的活性最大,将培养瓶盖拧紧后放回培养箱中,5分钟左右即用含血清的培养基终止消化。如果在室温情况下消
肾细胞CCC-HPF-1 人胚肺二倍体细胞(自建)CCC-ESF-1 人胚胎皮肤成纤维细胞(自建)HFF 人前皮肤成纤维细胞HFSF 人胚胎眼巩膜成纤维细胞HFTF 人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞HK-2 人肾小球上皮细胞HKC 人胚肾上皮细胞HSF 人皮肤成纤维细胞MRC-5 人胚肺成纤维细胞WISH 人羊膜细胞CCC-HEL-1 人胚胎肝正常细胞(自建)CCC-HEK-1 人胚胎肾正常细胞(自建)CCC-HHM-2 人胚胎心肌组织来源细胞(自建)CCC-HPE-2 人胚
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