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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
41
- 生长状态:
悬浮生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
人外周血淋巴细胞系;MC/CAR
- 规格:
株
细胞名称 人外周血淋巴细胞系;MC/CAR说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞是由Ritts RE J从一名81岁白人男性浆细胞瘤患者外周血分离并建立。该细胞能够表达免疫球蛋白,但没有分泌能力,细胞表面也未检测出免疫球蛋白。
培养条件 IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C7
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
人外周血淋巴细胞系;MC/CAR说明书培养方法:
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况,如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
培养实验又要开始了,科研工作者又该忙碌了,大家可能都在寻找适合自己的细胞,不用急,我们帮您掌舵,让您满意!
传代方法:细胞完全汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。
人外周血淋巴细胞系;MC/CAR说明书注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
人外周血淋巴细胞系;MC/CAR说明书培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
以下是人外周血淋巴细胞系;MC/CAR说明书的相关产品:
人 CKM 基因全长ORF克隆
人 AMPH 基因全长ORF克隆
人 CHCHD5 基因全长ORF克隆
人 PTPRC 转录变体1 基因全长ORF克隆
人 CPXM2 基因全长ORF克隆
人 FDPS 基因全长ORF克隆
人 C1QTNF4 基因全长ORF克隆
人 TTK 基因全长ORF克隆
人 SECISBP2 基因全长ORF克隆
人 BRK 基因全长ORF克隆
人 FANCC 基因全长ORF克隆
小鼠 1110008P14RIK 基因全长ORF克隆
人外周血淋巴细胞系;MC/CAR说明书人降钙素(CT)ELISA试剂盒人96T12.5-800 pg/mL小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒,英文名:17-OHP ELISA Kit人神经调节蛋白1(NRG-1)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒,英文名:AT ELISA Kit人骨膜蛋白(POSTN)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠骨织素(Ostn)ELISA试剂盒,英文名:Ostn ELISA Kit人黑素细胞蛋白PMEL(Melanocyte protein PMEL)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠迟现抗原(VLA)ELISA试剂盒,英文名:VLA ELISA Kit人前列腺素G/H合成酶2(PTGS2)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠S100-A5蛋白(S100A5)ELISA试剂盒,英文名:S100A5 ELISA Kit人Ras相关蛋白Rab-11A(Rab-11)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠转醛酶(TALDO1)ELISA试剂盒,英文名:TALDO1 ELISA Kit人睾蛋白聚糖2(Testican-2)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠细胞因子信号转导抑制因子2(SOCS2)ELISA试剂盒,英文名:SOCS2 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Deleted in malignant brain tumors 1 protein小鼠组织蛋白酶L(CTSL)ELISA试剂盒,英文名:CTSL ELISA Kit人Smad7 ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒,英文名:PKR1 ELISA Kit人转录起始因子TFIID亚基1ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠肌原纤蛋白1(FBN1)ELISA试剂盒,英文名:FBN1 ELISA Kit人尾加压素2B(Urotensin-2B)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠低氧诱导因子1α(HIF1α)ELISA试剂盒,英文名:HIF1α ELISA Kit大鼠β2-微球蛋白(β2M)ELISA试剂盒,英文名:β2M ELISA KitELISA Kit for Human Complement C5小鼠催乳素抑制激素(PIH)ELISA试剂盒,英文名:PIH ELISA Kit人碳酐酶Ⅸ(Carbonic anhydrase 9)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白介素12(IL-12)ELISA试剂盒,英文名:IL-12 ELISA Kit
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文献和实验了垂体单位在肿瘤免疫中的作用。为此构建了皮下移植瘤小鼠模型并检测了垂体激素的水平变化,皮下移植的细胞系包括免疫检查点疗法耐药的细胞系(LLC 肺癌细胞和 GMCSF 过表达的 B16F10 黑色素瘤细胞)和免疫检查点疗法敏感的细胞系(MC38 结肠癌细胞系和 MCA205 纤维肉瘤细胞)。结果发现,荷瘤小鼠模型血清中 α 促黑激素(α-MSH)的产生明显增加(图 1 A,B)。阿黑皮素原(POMC)经加工可产生 α-MSH,且正常情况下 POMC 主要在垂体中表达(图 1 C)。相比于对照组小鼠
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