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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
Heidenhain铁苏木素染色液以硫酸铁铵作为氧化剂和分化剂,根据不同的分化程度可显示不同的结构。染色后所有成分均为黑色或深灰黑色,不同组织结构的苏木素着色可被Heidenhain分化液以不同的速度进行性褪去,黑色褪去顺序依次为:线粒体、横纹肌、核染色质。
Heidenhain铁苏木素染色液
注意事项:
1、 Heidenhain Differentiation媒染时间和Heidenhain铁苏木素染色液染色时间根据不同的固定液而异。一般情况下,媒染和染色时间控制在1h即可,参考时间为:福尔马林、Bouin固定液、Carnoy固定液1h,Helly、Zenker等重铬酸盐固定液3h,Flemming固定液24h。
2、 显微镜下控制分化程度,直到出现所需观察的结构。若分化过度,可用苏木素重染相同时间并重新分化。亦可用蒸馏水2:1稀释Heidenhain Differentiation后再进行分化,以便更控制分化程度。
3、 切片分化后应彻底冲洗洗掉所有分化液,组织不易褪色。
4、 胞浆复染(伊红或橙黄G)可突出核染色质,尤其在显示染色体或有丝分裂更有效。
5、 切片脱蜡应尽量干净。
6、 系列乙醇应经常更换新液。
7、 冷冻切片染色时间尽量要短。
8、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验复红溶于100ml蒸馏水中。 (3)C液 0.2g台盼蓝溶于100ml 蒸馏水中。 染色液由40份A溶液,2.5份B溶液和2份C溶液组成。每40分A溶液加入,0.4ml浓盐酸。 [染色方法] (1)石蜡切片,脱蜡至水 (2)在Weigert铁苏木素中5ml。 (3)自来水洗。 (4)在染色液中染l0min。 (5)在水中迅速洗一下即经过50%、70%与95%乙醇,无水乙醇两次。 (6)二甲苯透明,中性树胶封固。 [结果] 核-蓝黑色;胞质-黄色,胶原纤维-粗纤维
工作液:2周 备注:显微镜评估H.E染色的标准,以观察苏木精着色为基础,否则,技术员要很有经验,凭眼睛观察确定苏木精染色效果。 McManus(PAS)特殊染色液的稳定性 ·过碘酸 2个月(液体一次性使用,丢弃) ·Coleman或Schiffs 冷藏:3个月 ·Mayers 6个月 ·亮绿 1个月
1g 蒸馏 水 16ml 先将甲液加热溶解,然后将乙液加热溶解,将甲、乙两液混合。再将丙液溶解后缓缓滴入,待全部混合后,再次煮沸一分钟,冷却后过滤,即可使用。 3.Heidenhain氏铁苏木素液 甲液:硫酸铁铵(紫色结晶) 5g 蒸馏水 100ml 乙液:苏木素 0.5g 无水酒精
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