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苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
Mayer苏木素染色液属于明矾苏木素液的一种,苏含量小,无氧化膜形成,对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色,故染色后不需盐酸乙醇分化,染色时间约3~5min。常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核,尤其适用于在经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染,此时染色时间较短(通常5~10min),染完后即可进行蓝化,不必分化。在特殊染色中,Mayer苏木素染色液与天青石蓝B联合染色,使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。
Mayer苏木素染色液
注意事项:
切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定。另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。
冷冻切片染色时间尽量要短。
蓝化液常使用0.2~1%或Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂溶液。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验应用的通常为明矾苏木素,明矾苏木素又有Harris苏木素,Mayer’s苏木素,和Ehrish苏木素等。 盐酸酒精分化切片,浓度有0.25%,0.5%和1%根据各人的情况而使用 伊红酒精浓度有0.25%,0.5%和1%之分,根据各单位的情况而定。 分化伊红须用浓度较高的酒精,以往伊红染色以后,用低浓度的酒精分化,洗去多余的染液,实践中发现低浓度的酒精褪色能力特强,如果掌握不好,染上的伊红,便会被褪去大部分。改用较高浓度酒精后,这种现象便不会出现。 伊红有水溶的和醇溶
液固定兔颈总动脉,用不同HE染色方法染色,比较不同方法的效果。染色结果是细胞核与细胞浆呈蓝红相映,色泽比较鲜艳。改良Harris法染色效果最好,染色效果受组织病理变化情况影响,有个体差异。 关键词:HE染色;改良Harris法;改良Lillie-Mayer’s法;改良Mayer法; 1 引言 在病理学实验课中,要观察大体标本和镜下标本,为了能更好的掌握实验课中所学的知识和内容,尤其
的DAB颜色有时可以采取增强方法。如加入金属离子:硫酸铜、六亚甲基胺银、氯化钴、硫酸镍铵、氯化镍及咪唑等。 复染 免疫组化染色后必须进行复染,以衬托出组织形态结构。目前常用 Mayer's 苏木素复染,一般 2 min 分钟左右,DAB 在核蛋白着色则可适当缩短复染时间,然后氨水或 pH 8.0 的 TBS 返蓝。 封片 为了持久保存,通常会使用中性树胶等封片。封片过程中注意斜靠盖玻片防止气泡产生影响观察。如果树胶较粘稠可以加入适量二甲苯稀释,使树胶在封片中能够快速扩散开。在脱水过后
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