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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 库存:
大量
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100ml
注意事项:
1、 如待检测组织富含内源性链亲和素-生物素,应考虑使用非链亲和素-生物素检测系统。
2、 避免反复冻融,否则容易失效。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤(仅供参考):
1、 切片脱蜡、水化。
2、 入内源性亲和素封闭液,孵育20min。
3、 PBS或Tris缓冲液中清洗5min。
4、 进行免疫染色的步骤。
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文献和实验质和核酸类等生物大分子结合,形成生物素衍生物结构,该结构具有保持大分子物质的原生物活性功能,同时,每个链酶亲和素分子有四个生物素结合部位,可以多价形式同时结合生物素化的大分子衍生物和酶标记物。因此,SABC法具有多级放大作用,使其在免疫组化实验时大大地提高检测方法的灵敏度 SV法的特点: 1.背景染色低:由于不用亲和素,避免了内源性生物素干扰,减少了假阳性、降低了背景染色 2.操作简便快速:仅需进行两次抗体孵育,更为简单、快速 3.核抗原染色强:多聚
。 7. 光漂白 减少照明强度/时间。 选用抗荧光淬灭封片剂。 二、背景太高了怎么办? 大家在操作时可以通过设置对照,帮助我们迅速判断背景的来源。对照包括自发荧光对照(无一抗、二抗)和无一抗对照。 1. 封闭不足 选用二抗种属来源的血清封闭。 选用链霉亲和素/生物素系统,需要用链霉亲和素封闭内源的生物链酶。 选用HRP系统,需要使用过氧化氢等商业化试剂盒去活化内源性HRP。 选用AP系统,需要使用左旋咪唑等商业化试剂去活化内源性
与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号,但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法,利用聚合物与二抗结合,形成聚合物-二抗复合物,实现信号放大,该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中,针对 HRP(辣根过氧化物酶)显色系统,其常用底物为DAB/AEC(HRP/DAB 呈棕褐色染色,具有很好的光稳定性,HRP/AEC 呈红色染色,在阳光下会褪色,不易保存。 基础 IHC
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