XmnI限制性内切酶

特别提示：包括XmnI限制性内切酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：XmnI限制性内切酶
英文名称：XmnI Restriction Endonuclease

产品货号：XmnI限制性内切酶
产品规格：5KU|1KU|500U

在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
被EcoRl 切割的位点经DNA聚合酶补平并平端连接后， 产生Xmn l的识别位点:GAATTAATTC。

除了XmnI限制性内切酶,，我公司还供应以下相关产品：



名称：λ核酸外切酶
货号：BTN130628
规格：1000U
λ核酸外切酶作用于双链DNA，沿 5´→3´方向逐步切去 5´单核苷酸。最适底物是5´磷酸化的双链DNA，也能缓慢降解单链DNA和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA的切刻或缺口处起始消化。

产品特点：
1．高效5´→3´核酸外切酶；
2．切下双链DNA的5´单核苷酸。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期半年。

活性定义：1单位指在50μl反应体系中，37℃条件下，30分钟内能从双链DNA底物上催化产生10nmol酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。

备注：5´-0H端的切割速度比5´-PO4端慢20倍。单链DNA比双链DNA慢100倍。

名称：BclI限制性内切酶
货号：SV0116
规格：15KU|3KU|1500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 75%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1，50℃。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性50%。
甲基化敏感性:
对 dam甲基化敏感。
注意事项:
该酶切割产生 5´ GATC的突出端，能够有效地与经 BamHl、Bglll、Mbol、Sau3Al和BstYl消化的 DNA 片段连接。

名称：HaeIII限制性内切酶
货号：SV0387
规格：15KU|15KU|3KU|3KU|1500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：PvuI限制性内切酶
货号：SV0624
规格：2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 25%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: <10%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1，37℃。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。

名称：Nt.CviPII切刻内切酶
货号：SV0791
规格：500U|100U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
实验证明该酶还具有内切酶活性，因此在大多数反应中建议最佳反应时间为1 小时。电泳检测时，建议上样缓冲液中SDS 终浓度:为 0.4%。

名称：核酸内切酶 VIII
货号：SV1114
规格：5KU|1KU
特性:
单细胞凝胶电泳（彗星试验）
碱洗脱
碱解旋
概述:
大肠杆菌核酸内切酶 VIII 既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶（AP）位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的 3´ 和 5´ 端切割磷酸二酯键，产生 5´ 磷酸和 3´ 磷酸末端。能被核酸内切酶 VIII 识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 VIII 与核酸内切酶 III 的活性相似，但核酸内切酶 VIII 具有 β 和 δ 裂解酶活性，而核酸内切酶 III 只有 β 裂解酶活性。
来源:
克隆有 nei 基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件:
1X Endonuclease VIII 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl，75 mM NaCl，1 mM EDTA（pH 8.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活:75℃ 加热 10 分钟。
质保声明:
核酸内切酶 VIII 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中，37℃ 条件下，1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
*AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的 34 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。
彗星试验的推荐稀释倍数:
1:104～1:105。详细步骤请联系我们咨询。
浓度:
10,000 units/ml。

名称：T4连接酶
货号：JN0066
规格：28KU
  T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的 连接反应，也能催化双链RNA 5′-磷酸末端和3′-羟基末端间的连接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上反应均需消耗ATP。

产品组成：

组份	体积
T4 DNA连接酶 （350U/μl）	80μl
2×Quick Ligation Buffer	1ml
10×T4 DNA Ligation Buffer	1ml

产品特点：
随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择：而使用10×T4 DNA Ligation Buffer，16℃过夜连接可获得最高的连接效率；使用快连Buffer在室 温(25℃)下，仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的连接 反应。

产品用途：
1、DNA片段和载体DNA的连接。（参见实验方案）。
2、DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。

使用建议：
1、粘末端的连接反应：插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要，此比例在2-6之间最好，低于2:1就会导致较低的连接效率，高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。
2、平滑末端的连接反应：平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时，可提高DNA浓度，将使用酶量增加到突出末端量的2～5倍左右。
3、向粘粒或噬菌体进行连接反应：可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1，同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05～0.1μg／μl以上)
4、反应温度： 该酶的最适温度为37℃，由于热稳定性较差，因此 长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室 温下进行反应。
5、抑制剂：T4 DNA连接酶要求Mg2+，因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用，最好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。

应用实例：

图 例 1 ） 在25℃，用不同活性单位（2U、4U、6U）T4 DNA连接酶与λDNA/Hind III 片段作用10分钟后的结果以及连接产物灭活T4连接酶后再次使用Hind III酶切结果。
泳道1：λDNA/Hind III；
泳道2：λDNA/Hind III+2U T4 Ligase；
泳道3：λDNA/Hind III+4U T4 Ligase；
泳道4：λDNA/Hind III+6U T4 Ligase；
泳道5：λDNA/Hind III ,T4 Ligase连接产物，Hind III酶切

活性定义：在20μl的连接反应体系中, 6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时, 有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个单位。

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

快速连接步骤：
1、取50 ng载体和3倍摩尔量的插入片段，用双蒸水调整总体积为10μl。
2、加入10μl 2×Quick Ligation Buffer，混匀。
3、加入0.5～1μl T4 DNA连接酶，充分但轻柔混匀（切勿剧烈震荡，可能导致酶部分失活）。
4、稍事离心，置于室温 (25℃) 作用5分钟。
5、冰上放置，转化（如不立即进行转化实验请冻 存于-20℃）