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人胚肺成纤维细胞;MRC-5
A类
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上海研生
21
贴壁生长
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否
成纤维细胞样
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人胚肺成纤维细胞;MRC-5
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株
人胚肺成纤维细胞;MRC-5使用说明书产品基本信息:
细胞名称 人胚肺成纤维细胞;MRC-5使用说明书
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,该细胞老化前能传代42~46个倍增时间。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:2~1:5传代;每周1~2次。
传代情况 P20
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:11,14;D16S539:9,11;D18S51:15,21;D19S433:14,15;D21S11:31.2;D2S1338:20;D3S1358:15,17;D5S818:11,12;D7S820:10,11;D8S1179:13;FGA:21,23;TH01:8;TPOX:8;vWA:15;
同工酶
染色体 46,XY,部分细胞为亚二倍体
使用权限 A类
人胚肺成纤维细胞;MRC-5使用说明书培养方法:
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况,如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
培养实验又要开始了,科研工作者又该忙碌了,大家可能都在寻找适合自己的细胞,不用急,我们帮您掌舵,让您满意!
传代方法:细胞完全汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。
人胚肺成纤维细胞;MRC-5使用说明书培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
以下是人胚肺成纤维细胞;MRC-5使用说明书的相关产品:
锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体 人 PD1 / PDCD1 / CD279 ELISA配对抗体
有丝分裂激酶B抗体 人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 ELISA配对抗体
磷酸化Ack1抗体 人 CD157 / BST1 ELISA配对抗体
磷酸化Ack1抗体 人 CD32b / FCGR2B ELISA配对抗体
磷酸化β抑制蛋白1抗体 人 Fetuin-A / AHSG / FETUA ELISA配对抗体
磷酸化有丝分裂激酶A抗体 人 CEACAM6 / CD66c ELISA配对抗体
磷酸化APS抗体 人 IL6R / CD126 ELISA配对抗体
有丝分裂激酶A抗体 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 ELISA配对抗体
干扰素诱导蛋白AIM2抗体 人 MICB / MIC-B ELISA配对抗体
水通道蛋白-2抗体 人 IGF1R / CD221 / CD221 ELISA配对抗体
肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体 甲型流感 H5N1 (禽流感) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配对抗体
ADP核糖基化因子样11抗体 甲型流感 H1N1 (猪流感 2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配对抗体
ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体
ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体
ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体
自噬相关蛋白10抗体
酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体
氨基酰化酶1抗体
脂肪甘油三酯脂酶抗体
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
双调蛋白抗体
磷酸化水通道蛋白2抗体
粘附相关激酶抗体
磷酸化粘附相关激酶抗体
磷酸化蛋白激酶B抗体
磷酸化水通道蛋白2抗体
猪诱导型合成酶(iNOS)ELISA Kit Pig inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit
猪游离脂肪酸(FFA)ELISA Kit Pig free fatty acids,FFA ELISA Kit
猪游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA Kit Pig free tri-iodothyronine indes,FT3 ELISA kit
猪游离甲状腺素(FT4)ELISA Kit Pig free thyroxine,FT4 ELISA kit
猪胰高血糖素样肽2(GLP2)ELISA Kit Pig glucagon like peptide 2,GLP2 ELISA kit
猪胰高血糖素样肽1(GLP1)ELISA Kit Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit
猪胰高血糖素(GC)ELISA Kit Pig Glucagon,GC ELISA Kit
猪胰淀粉酶α2(PAMY α2)ELISA Kit Pig Pancreatic Amylase α2,PAMY α2 ELISA Kit
猪胰岛素原(PI)ELISA Kit Pig Proinsulin,PI ELISA Kit
猪胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA Kit Pig insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
猪胰蛋白酶(Trypsin)ELISA Kit Pig Trypsin ELISA Kit
猪氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)ELISA Kit Pig peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA kit
猪血栓素A2(TXA2)ELISA Kit Pig Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit
猪血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA Kit Pig serum amyloid A,SAA ELISA Kit
猪血浆激肽释放酶(KLKB1)ELISA Kit Pig plasma kallikrein,KLKB1 ELISA Kit
猪血红蛋白(Hb)ELISA Kit Pig hemoglobin,Hb ELISA Kit
猪血管舒缓激肽(BK)ELISA Kit Pig Bradykinin,BK ELISA Kit
猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)ELISA Kit Porcine Vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit
猪血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA Kit Pig Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA KIT
猪血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA Kit Pig Angiotensin converting enzyme 2,ACE2 ELISA Kit
猪血管紧张素转化酶(ACE)ELISA Kit Pig Angiotensin Converting Enzyme,ACE ELISA Kit
猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA Kit Pig angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
猪血管活性肠肽(VIP)ELISA Kit Pig Vasoactive Intestinal Peptide,VIP ELISA Kit
猪旋毛虫IgG抗体(Trichinella IgG Ab)ELISA Kit Pig Trichinella IgG antibody ELISA Kit
人胚肺成纤维细胞;MRC-5使用说明书猪胸腺肽β4(Thymosin β4)ELISA Kit Pig Thymosin β4 ELISA Kit
猪心型脂肪酸结合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)ELISA Kit Pig Fatty acid-binding protein, heart,FABP3 ELISA kit
猪心钠肽(ANP)ELISA Kit Pig Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISA Kit
猪心肌特异性肌钙蛋白T(ELISA Kit Pig cardiac isoform of Tropnin T,ELISA Kit
人胚肺成纤维细胞;MRC-5使用说明书注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
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