- ¥280
- 晶抗
- JK2705
- 进口/国产
- 2025年07月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件：
低温避光
- 规格：
2×500ml
操作步骤(仅供参考)：
临用前，取原位杂交显影液A液、B液恢复至室温，等量混合，轻轻混匀。
暗盒中室温密闭显影5～15min，显影时间和温度应根据实验具体条件而定。
水洗：立即置于停显液或蒸馏水中水洗。
注意事项：
1、 曝光、显影、定影步骤均应在严密的避光环境中进行。
2、 使用后的A-B混合液可暂时保存，如果显影不足，可重新或继续显影。
3、 临用前等量混合，不宜久置。
4、 A液产生衬垫时，应弃用，否则会产生高背景。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验并定容至1000ml。 配制同上。 左旋咪唑有消除内源性磷酸酶的作用。 九、原位杂交信号显示 目前应用原位杂交方法中，信号的显示主要有放射自显影，酶底物及免疫金银等方法，在此归纳有关的主要试剂。 1．A-B显影液 称取上述试剂，按配方分别溶于50ml ddH2 O中，于显影前，在室温将两者（A液及B液）按1：1混合，稍加摇动促进混合，即可将贴有切片标本的切片放入显影液，于室温避光（可暗室）反应5～
，pH8.2洗膜3次，每次15min。 (10)显影。 A液(对苯二酚0.85g，柠檬酸2.55g，柠檬酸钠2.35g，水50ml)B液(AgNO3 93mg，水50ml)按1：1混匀为显影液。将膜浸泡在显影液中，避光显影至出现深色斑点。用25%海波定影1-2min。 四.原位杂交和杂交子的检测 1.原位杂交 (1)按电镜常规制片程序，将用K4M树脂包埋的玉米根、松根等材料进行超薄切片，将其捞在镍网上。 (2)将载有切片的镍网放在2×SSC液面上于700℃浸30min，以破坏rRNA
涂片，用95%乙醇、5%乙醇固定5min，PBS冲去固定液，加含探针的杂交液覆盖（光敏生物素标记探针浓度为2.5ng/μl），在温盒中50℃孵育1～2h，取出后直接加入胶体金标记链亲合素（1mg/ml）室温孵育15min，然后在室温或37℃下用大容量（200ml/每片）洗脱液（2×SSC，0.1%Triton X-100）分别冲洗5～10min，以银显影液放大金颗粒显示原位杂交结果，可用1%伊红复染，脱水，透明，封片，镜检。 如为冰冻切片（cryostat section 10～15μm），应
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