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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
113
- 英文名:
LXR luciferase reporter plasmid
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1μg
特别提示:包括LXR-Luc荧光素酶报告基因质粒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:LXR-Luc荧光素酶报告基因质粒
英文名称:LXR luciferase reporter plasmid
产品货号:LXR-Luc荧光素酶报告基因质粒
产品规格:1μg
LXR荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(LXR luciferase reporter plasimd)是用于检测LXRα转录活性水平为目的的报告基因。LXRα(liver X receptor α)转录因子核受体家族的成员之一。LXRα仅在肝脏、肾脏、小肠、肺、肾上腺和巨噬细胞中表达。LXRs(liver X receptor)参与机体多种生理活动的调节,包括胆固醇的代谢、脂肪的形成、糖原异生和炎症等过程。
LXR报告基因主要用于检测细胞中LXRα的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMLXRα-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个LXRα结合位点,可以高灵敏度地检测LXRα的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得LXR报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
1.pGMLXRα-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2.LXRα的激活剂,可作为LXR报告基因的阳性对照。
储存条件:-20℃。
除了LXR-Luc荧光素酶报告基因质粒,,我公司还供应以下相关产品:
名称:NF-κB萤火虫荧光素酶报告基因质粒
货号:SY0059
规格:1μg
NF-κB-Luc荧光素酶报告基因质粒(NF-κB luciferase reporter plasmid)是用于检测NF-κB转录活性水平为目的的报告基因。NF-κB基因在炎症反应、免疫应答和抑制细胞凋亡等方面有着重要的作用。
NF-κB荧光素酶报告基因(报告基因质粒)主要应用于NF-κB信号通路的研究和基于NF-κB信号通路的药物研究以及癌细胞中NF-κB的调控机制的研究。
pGMNF-ΚB-Lu是改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个NF-κB结合位点,可以高灵敏度地检测NF-κB的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得NF-κB报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱
使用说明
1.pGMNF-Κb-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2.TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的NF-κB激活剂,可作为NF-κB报告基因的阳性对照。
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
名称:pGMLR-TK海肾荧光素酶报告基因质粒
货号:SY0115
规格:1μg
pGMR-TK海肾荧光素酶报告基因(pGMLR-TK luciferase reporter)是野生型海肾荧光素酶(RLUC)报告基因对照载体。它可与萤火虫荧光素酶报告基因载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾荧光素酶的表达为试验中的荧光素酶报告基因正态化提供内对照值,减少实验材料背景值得影响。
PGMR-TK海肾荧光素酶报告基因是以HSV-胸腺嘧啶核苷激酶为启动子(TK),适合于海肾荧光素酶报告基因载体中组成型表达。
质粒图谱
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
名称:GLI3-Luc报告基因质粒
货号:SY0144
规格:1μg
GLI3报告基因是用于检测GLI3转录活性水平为目的的报告基因。GLI3可以抑制dHand 和 Gremlin来调控手指的发育,它的突变会引起肢端胼胝体综合征,Greig端部多发性并指综合征,Pallister-Hall综合征等相关疾病。
GLI3报告基因主要检测细胞sonic hedgehog信号通路中GLI3的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMGLI3-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多GLI3结合位点,可以高灵敏度地检测GLI3的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得GLI3报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱
使用说明
pGMGLI3-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
名称:RAR-GFP报告基因质粒
货号:SY0160
规格:1μg
RAR GFP Reporter Plasmid是用于检测RAR转录活性水平为目的的报告基因。视黄酸是一种亲脂性分子和维生素A的代谢物,影响基因的转录和一些生物进程的调节,例如细胞增殖、凋亡和分化等。视黄酸对基因转录的调控取决于视黄酸到靶细胞运输率和在目标组织中视黄酸对RAR(Retinoic Acid Receptor)的曝光时间。
RAR-GFP报告基因主要用于检测细胞细胞Retinoic Acid Receptor信号通路中RAR的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMRAR-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个RAR结合位点,可以高效地检测RAR的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得RAR-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGMRAR -GFP质粒测序引物:
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMRAR -GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
名称:AARE-GFP报告基因质粒
货号:SY0186
规格:1μg
AARE-GFP报告基因是用于检测ATF4/3/2转录活性水平为目的的报告基因。随着氨基酸的消耗,GCN2被激活并且使elF2a磷酸化,这将使ATF的翻译增加,激活的ATF4将结合AARE调控目的基因的表达。
AARE-GFP报告基因主要检测细胞中Amino Acid Deprivation信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMAARE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个AARE结合位点,可以高效地检测ATF4/3/2的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得AARE-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGM AARE-GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMAARE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
名称:Rb-GFP报告基因质粒
货号:SY0202
规格:1μg
Rb-GFP报告基因是用于检测Retinoblastoma protein转录活性水平为目的的报告基因。Retinoblastoma protein(Rb)是一种肿瘤抑制蛋白,在多种癌细胞中是发生功能障碍的。Rb是通过抑制处于分裂期细胞的细胞周期进程阻碍细胞的过度增殖。
RB-GFP报告基因主要用于检测细胞中cell cycle信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMRB-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个RB结合位点,可以高效地检测RB的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得RB-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGM Rb -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMRb-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
名称:即用型腔肠素h
货号:SY0236
规格:10 vials
本品是即用的腔肠素h,特别设计用于体内成像研究。通过最小化产品成分的变化,最小化冻融次数和严格控制不同批次的产品,确保客户得到高重复性的结果。产品的优点在于:1)溶于丙二醇和柠檬酸的腔肠素h,稳定性高,即开即用,不用考虑粉末配置成液体的稳定性问题。2)预制配方,不同批次间严格控制,特别设计用于体内研究;3)即用型产品通过最小化预成像准备步骤,减少时间和精力;4)经IVIS成像系统验证,控制体内成像质量;
本包装含有10瓶无菌腔肠素h即用型溶液,每瓶含1.2ml浓度为150 μg/mL的Coelenterazine h。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点:
1)能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;
2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂;虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。
3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。
图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
腔肠素h(Coelenterazineh)是海肾荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的作用底物,其发光强度比天然腔肠素高10倍以上,适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子,可用于检测活细胞中钙离子浓度。
运输和保存方法:冰袋运输。≤-20℃避光保存,最好放到-70℃长期避光保存。
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文献和实验【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题,两者的区别我基本清楚了,只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒(分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因)呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话,是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因,还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件?谢谢 msniu
longgyin8341 我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞? 若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢 longgyin8341
【求助】请教一个关于双荧光素酶报告基因检测系统中共转染两种报告基因质粒的比例的问题?
lsdcfhyj 用双荧光素酶报告基因检测系统进行报告基因检测时需要共转染两种荧光素酶报告基因质粒,但是我不知道两种质粒间的比例是多少,有哪位前辈做过这方面实验的,请帮我指点一下,谢谢了 xxshc 这个比例没有特别的规定。我用的pRL-TK(海蜃素荧光素酶)的荧光值要高一些,我转20ng/孔(24孔板),作为内参.pGL3(萤火虫荧光素酶)的荧光值低一些,我转0.4ug/孔(24孔板)然后0.4ug的调整质粒。这样的话,萤火虫荧光素酶
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