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- 上海烜雅
- XY-MY-1026
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- 2025年07月10日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
100
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃，避免反复冻融
- 规格：
20
植物基因组DNA提取试剂盒使用方法如下：
操作步骤：使用前先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、植物组织预处理：取新鲜植物组织（不超过100mg）或干重组织（不超过20mg），于液氮中充分研磨至细粉状，让液氮自然挥发。
2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有400ul溶液PA、20ul RNase A（10mg/ml）和5ul β-巯基乙醇的离心管中，充分颠倒混匀，室温放置10min。
3、加入140ul溶液PB，充分颠倒混匀，12000rpm离心10min，将上清转移至新离心管中(约400-500ul)，注意不要吸入沉淀。
4、加入和上清相同体积的溶液PC，充分颠倒混匀，再加入和溶液PC相同体积的无水乙醇，此时若出现絮状物，将絮状物吹散后一起加入吸附柱中，12000rpm离心5min，弃废液，一次加不完可分两次加入。注意：如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象，可向吸附柱中加入600ul无水乙醇，并适当延长离心时间。
5、 向吸附柱中加入600ul漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管。
6、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中， 12000rpm离心2min。
7、将吸附柱置于室温或50℃温箱放置数分钟，否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR等。
8、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置1-5min，12000rpm离心2min，即可得到高质量的植物基因组DNA。
9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心2min。
注意事项：
1、组织应尽量选取新鲜幼嫩样本，富含多糖多酚的组织可能会提取失败，请选用多糖多酚专用试剂盒。
2、如果试剂盒中的试剂出现沉淀，可在65℃水浴中融化，不影响使用。
3、洗脱缓冲液的体积不能小于50ul，DNA产物应-20℃保存。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP321 快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml离心管4. 异丙醇，70%乙醇，干净吸水纸5. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机本文版权归天根生化科技（北京）有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
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