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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
ERCC1 ELISA Kit
- 库存:
25
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 应用:
酶联免疫吸附法
- 检测方法:
酶联免疫吸附法
- 检测范围:
用于测定血清、血浆、组织、尿液、及相关液体等样本
- 供应商:
上海邦景
- 规格:
48T96T
英文名称: ERCC1 ELISA Kit
英文缩写:ERCC1
剪切修复交叉互补修复缺陷偶联因子1试剂盒图片ELISA测定错误的原因分析:ELISA测定出现假阳性和假阴性的结果,主要有标本因素、试剂因素和操作因素,其中标本因素主要由干扰性物质所致,分内源性和外源性两种。
剪切修复交叉互补修复缺陷偶联因子1试剂盒图片的选择方法:
1. 明确检测何种蛋白;
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性zui好;
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;
4. 咨询我公司使用的抗体类型;
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。
剪切修复交叉互补修复缺陷偶联因子1试剂盒图片动物组织匀浆的制备:
1、取组织块(0.1g~0.2g)zui少可到2~5mg在冰冷的盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的溶液)或者0.86%的盐水于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种:手工匀浆,机器匀浆,超声粉碎。
① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
③ 超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用400安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定。
对于测定结果的判定主要分定性和定量两种:
①定性测定:定性测定的结果判断一般分为"阳性"和"阴性"两种。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应,"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在间接法和夹心法ELISA中,阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反,阴性孔呈色深于阳性孔。
②定量测定:在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
A.测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线最高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数值,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。
B.测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系,这更有利于测定系统的表达。
剪切修复交叉互补修复缺陷偶联因子1试剂盒图片ELISA的操作要点:
1)标本的采取和保存:可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本;
2)试剂的准备:所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液;
3)加样:一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。
4)保温:ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育。
5)洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
6)显色和比色:显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
7)结果判断:分定性判定和定量判定。
剪切修复交叉互补修复缺陷偶联因子1试剂盒图片作要点:
☆标本的采取和保存:可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本;
试剂的准备:所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液;
加样:一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。
保温:ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育。
洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
显色和比色:显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
结果判断:分定性判定和定量判定。
人 ARL2BP 基因全长ORF克隆
人 CCDC28A 基因全长ORF克隆
人 KARS 基因全长ORF克隆
人 SNX9 基因全长ORF克隆
人 ENC1 基因全长ORF克隆
人 CALR / Calreticulin 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 CALU / Calumenin 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 ROBO2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 MGST3 基因全长ORF克隆
大鼠 PRDX2 基因全长ORF克隆
大鼠 ECH1 基因全长ORF克隆
大鼠 RPL15 基因全长ORF克隆
大鼠 GSTM7 基因全长ORF克隆
正常脑组织芯片 进口/国产
多器官正常组织芯片 进口/国产
正常胎盘组织芯片 进口/国产
正常肝组织芯片 进口/国产
正常肾组织芯片 进口/国产
磷酸化能受体β2抗体 Anti-phospho-ADRB2 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化水通道蛋白2抗体 Anti-phospho-AQP2 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化自噬相关蛋白3抗体 Anti-phospho-ATG3 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
醛缩酶2抗体 Anti-ALDOB WB IHC-P IHC-F IF 100ul
胰腺α淀粉酶抗体 Anti-AMY2A WB IHC-P IHC-F IF 100ul
剪切修复交叉互补修复缺陷偶联因子1试剂盒图片小鼠抗单克隆抗体 Anti-Marijuana WB IHC-P IHC-F IF 100ul
肌球蛋白轻链1/3抗体 Anti-MYL1+3 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
磷酸化肌球蛋白轻链抗体 Anti-phospho-MLC WB IHC-P IHC-F IF 100ul
肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1抗体 Anti-MuRF1/Trim63 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
泛素蛋白连接酶抗体 Anti-MAFbx/Fbx32 WB IHC-P IHC-F IF 100ul
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文献和实验华人学者开发新型单碱基编辑系统,实现所有碱基的自由转换和增删!
~50bp 处加上一条 sgRNA,使用 Cas9 剪切酶来切割未编辑的 DNA 链,并以编辑后的 DNA 链为模板,引导 DNA 修复到未编辑的 DNA 链上,建立了 PE3 和 PE3b 系统,进一步对 PE 系统进行了优化。(图 4)图 3:PE 系统编辑基因原理图片来源:nature图 4:PE3 和 PE3 原理图片来源:nature如文中所述,Prime Editor 系统相较于同源修复(HDR),提供了效率和产物纯度上的优势;与碱基编辑器(CBE、ABE 见下文)进行了优劣上的互补
的核酸含有 2~5% RNA;这些 RNA 是非编码的序列,在染色质结构和转录沉默中有重要作用。 然而,因为染色质的复杂度以及染色质中大量 DNA 的存在,用传统的 ChIP 技术研究这些 RNA 是很困难的。为了使基因组调控中 RNA 的功能研究变得可能,我们利用其在 ChIP 的技术研发了 RNA-ChIP 的第一代试剂盒,主要用于研究染色质中 RNA-蛋白质的相互作用。 RNA-蛋白质的相互作用用甲醛固定,染色质剪切结合 DNA 酶处理得到了可以用特
保护抗原和固定组织作用,过氧化氢孵育时间过长易引起脱片;现用现配,配好后4 ℃避光保存。不过,现在已有"第二代即用型免疫组化试剂盒"避免内源性生物素的干扰,推荐使用。 7)血清封闭 组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合,造成后续结果的假阳性;封闭血清一般是和二抗同一来源的,血清中动物自身的抗体,预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合;也可以用小牛血清、BSA、羊血清等,但不能与一抗来源一致。一般室温 10-30 min。但也要防止封闭过度 8)一抗和二
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