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- 2025年07月09日
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上海研生
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标本溶血：
1、脱水、休克等疾病使得穿刺困难而溶血；
2、抽血器质量不合格导致溶血；
3、血清分离不当导致溶血；
4、红细胞有先天或获得性缺陷而易破坏溶血；
5、患溶血性疾病。
溶血的干扰机理：
1、血细胞中浓度远高于血清浓度：血细胞中高浓度物质溢出，测定结果偏高。如K、CK、LDH、AST等，轻度溶血即可有很大影响。
2、血细胞中浓度低于血清浓度：此时溶血相当于血清稀释而结果偏低。如血糖、r-GT等。
、检测大多是检测化学反应前后颜色变化程度来计算待检物浓度。血红蛋白的红颜色会造成干扰。
控制影响因素：
开展常规项目的室内质量控制，绘制质控图和观察室内环境；谨慎使用检测方法学；
在使用某一方法时，先虑标本量是否太少或血清凝固，需重新处理标本进行测定；如果是采用速率法，要考虑是否是酶活力过高；动态反应曲线是否正常，注意有无提示数据报警；
仪器方面，如果发现某一时间的结果全部偏低，就要考虑是否引入了系统误差，是否发生仪器的样品针堵塞，搅拌棒搅拌不均等情况，或样品针注射器漏气，或试剂的交叉污染，或光源灯老化等问题；避免标本的溶血或脂血现象。
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文献和实验4、底物溶液（2.5 mmol/L）：精密称取 N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）（Sigma）42.8 mg，加入相应 50 ml 体积的测活缓冲液，使其溶解，即为 2.5 mmol/L 的底物母液，现配现用, 使用时，用测活缓冲液 10 倍稀释。 5、供试品：精密称取待测样品适量。平行分装 3 支，置于蓝冰保温运输箱内，室温下放置。 实验方法： 1、重组胰蛋白酶运输条件下的稳定性：样品测定活性，作为初始活性。蓝冰于-20℃ 充分预冷后，取出，与样品同时放入泡沫保温运输
基酸的羧基所形成的酰胺键和酯键，有高度的专一性仍表现为对碱性氨基酸羧基一侧的选择对此等化学键的催化水解活性的敏感度为：酯键>酰胺键>肽键。因此，可以利用含有这些化学键中任一种键型的底物来研究胰蛋白酶的专一催化活性。 本实验方法一采用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯作为底物，水解反应如下：N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)在波长253nm下的紫外光吸收远远弱于N-苯甲酰-L-精氨酸的紫外光吸收。在胰蛋白酶的催化下，BAEE随着酯键的水解，水解产物BA逐渐增多，反应体系的紫外光吸收亦随之相应
基酸(精氨酸、赖氨酸)的羧基与其他氨基酸的氨基所形成的键具有高度的专一性。此外还能催化由碱性氨基酸和羧基形成的酰胺键或酯键，其高度专一性仍表现为对碱性氨基酸一端的选择。胰蛋白酶对这些键的敏感性次序为：酯键> 酰胺键> 肽键。因此可利用含有这些键的酰胺或酯类化合物作为底物来测定胰蛋白酶的活力。目前常用苯甲酰-L-精氨酸-对硝基苯胺(简称BAPA)和苯甲酰-L-精氨酸-β-萘酰胺(简称BANA)测定酰胺酶活力。用苯甲酰-L-精氨酸乙酯(简称BAEE)和对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯(简称TAME)测定酯
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