末端转移酶CAS号:9027-67-2

末端转移酶CAS号:9027-67-2

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  • 上海抚生
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    • 英文名

      TDT

    • CAS号

      9027-67-2  

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      详见说明书

    • 供应商

      上海抚生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      详见说明书

    末端转移酶CAS号:9027-67-2各位从事科研工作的小伙伴们,实验中所用到的试剂、配制试剂的液体,有时可能是实验成败的关键,因此大家在使用时一定要留意各种试剂的级别。原则上讲,纯度越高越好,但是价格也就越高,所以要根据各自的需要选择合适的品质,避免不必要的浪费!
    末端转移酶CAS号:9027-67-2
    英文名称:TDT;Terminal Transferase;Terminal Deoxynucleotidyl Transferase  

    其他名称:末端脱氧核苷酸转移酶;胸腺五肽  
    CAS号:9027-67-2  
    分子量:60000  
    级别:BR  
    来源:大肠杆菌细胞,含有编码牛胸腺末端脱氧核苷转移酶的基因  
    浓度:20u/ul  
    活性定义:是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量  
    酶活性分析混合物:66mM二甲钾(PH7.2),1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP  
    保存液组分:100mM 醋酸钾(PH6.8)、2mM β-巯基乙醇,0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油  
    5×反应缓冲液:1M 二甲钾、125mM Tris,0.05%(v/v) Triton X-100,5mM CoCL2(PH7.2,25℃)  
    抑制剂:金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子  
    失活:加入EDTA,70℃加热10分钟  
    质量保证:测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染  
    注意:由于含有CoCL2,TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容,需采用柱离心法或/氯抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物,除去CoCL2  
    性状(以下信息仅供参考):悬浮液,重组酶。末端转移酶(Terminal transferase, TdT)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是:先在载体上打开一单个位点,把它与末端转移酶和某一dNTP(如dATP)一起保温以使添尾,另一待插入的外源DNA片段则用互补的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA片段彼此退火,使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受全菌所修复。用途:
    本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)催化DNA的3'末端添加同聚物;DNA的3'末端标记  保存:
    -20°C  

    末端转移酶CAS号:9027-67-2试剂间的干扰原因:
    试剂中含有下一测试所要测定的底物,或是含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用,因而直接干扰下一反应的测定结果;
    该试剂所引导的反应对下一项目的反应进程带来了间接的干扰,因为在有试剂污染的情况下,下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果。下面通过对试剂成分的分析和相应试验来找出试剂交叉污染可能带来的情况,进而指导相应的项目调整和结果分析
    末端转移酶CAS号:9027-67-2试剂间可能发生的干扰情况
    1.ALT(IFCC)、AST(IFCC)试剂中含有高活力LD成分,有可能会对LD的测定带来干扰;
    2.ALP(IFCC)、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)、CO2(PEPC)、α-Amy(EPS)等试剂中使用缓冲液,可能会对其后的Mg2+ 测定带来干扰;
    3.ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、 α-HBDH(DGKC)等试剂使用缓冲液,可能会对无机磷的测定带来干扰; 
    4.CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)试剂中含有Glu成分,其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反应过程,因此可能对Glu测定带来干扰,尤其对Glu的HK法测定可能带来严重干扰;
    5.Mg2+试剂 (Calmagite)中含有EGTA成分,为Ca2+络合剂,可能对Ca2+的测定带来干扰; 
    6.个别试剂以甘油做酶的保护剂,因此可能对TG的测定带来干扰,等等; 
    7.低密度脂蛋白、甘油三酯、胆固醇的试剂成分中都含有CE、CHOD、POD酶,都会与血清成分反应,生成的中间反应产物是H2O2浓度,因为低密度脂蛋白和甘油三酯检测单位都是mmol/L级,而尿酸检测单位是μmol/L级,二者之间相差1 000倍,故检测尿酸的反应杯中只要残留极少量的低密度脂蛋白和胆固醇试剂就可产生大量的H2O2,直接导致尿酸的检测结果的升高;
    8.葡萄糖对尿酸试剂的干扰GLU(OX)与UA测定原理均采用Trider's反应方法,试剂探针残留携带的GLU带入到UA反应体系,发生血糖反应其产物红色醌亚胺与UA产物红色醌亚胺颜色叠加,而血清中正常血糖含量远高于尿酸水平,从而导致UA结果严重偏高; 
    9.胆固醇(TC)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL) 会对总胆汁酸检测的影响,导致胆汁酸测定值增加。这些试剂中为了保证反应充分,往往含有胆酸钠成分或是一些脂类水解促进剂等,这些物质导致了样本胆汁酸测定的携带性增高及内源产物等副反应性增高; 
    10.谷丙中的含有的酮戊二酸NADH反应体系会干扰总胆汁酸检测中的Thio-NAD-Thio-NADH循环指示体系,导致测定值偏低;
    由于各个试剂公司所提供的产品说明书常不能全面反映试剂的组成情况,所以通过实验发现试剂交叉污染可能带来的干扰变得很重要。下面以两个试验来加以说明
    A.将试剂作为样本进行全套项目测定,根据结果确定发生试剂交叉污染时造成直接干扰的项目。  
    B.将一份样本分为两份,一份加生理盐水或其他适当的稀释液,另一份加等量的试剂,同时测定、考察结果的变化,进而确定可能发生试剂交叉污染时造成干扰的项目。进行这一实验时,使用半自动生化分析仪可能会得到更为理想的结果,尤其是针对双试剂反应时, R1、R2加入时机可以得到更为精确的控制。 
    此外,由于试剂成分的复杂多样性,实时仪器状况的独特性,可能发生的试剂间的交叉污染的情况不尽相同。
    以下是公司正在热销的产品点击咨询 
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