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根据对培养组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
(1)天然培养基。天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。例如培养细菌常用的肉汤蛋白胨培养基:牛肉膏3g,蛋白胨5g,水1000mL。
用做这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源广泛,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基和大生产上的培养基。
这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响,另外自养微生物一般不能在其上面生长。
(2)合成培养基。合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。例如培养细菌的葡萄糖铵盐培养基:C6H12O60.2%,K2HPO40.7%,KH2PO4 0.3%,Na3C6H5O70.05%,MgSO4·7H2O0.01%,(NH4)2SO40.1%,H2O 100mL。
这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。
(3)半合成培养基。在合成培养基中,加入某种或几种天然成分;或者在天然培养基中,加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马铃薯蔗糖培养基等。如果在合成培养基中加入琼脂,由于琼脂中含有较多的化学成分不太清楚的杂质,故也只能算是半合成培养基。这种培养基在生产实践和实验室中使用最多。
BL琼脂培养基价格按培养基的物理状态区分
培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
用于微生物分离,鉴定,计数。如图,微生物分离成菌落、菌苔。图中为大肠杆菌菌落,是用涂布平板法得到。
用于分离微生物的固体培养基
用于分离微生物的固体培养基
(2)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
用于观察微生物运动特征。如图,左侧试管中微生物不运动,而右侧试管中微生物运动,因而两试管中现象不同
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
(3)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业。
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文献和实验实验原理 常用的化学消毒剂主要有重金属及其盐类,酚、醇、醛等有机化合物以及碘、表面活性剂等。它们的杀菌或抑菌作用主要是使菌体蛋白质变性,或者与酶的—SH基结合而使酶失去活性所致。 本实验是观察某些常用的化学药品在一定浓度下对微生物的致死或抑菌作用,从而了解它们的杀菌或抑菌性能。 为了比较各种化学消毒剂的杀菌能力,常以石炭酸为标准,即将某一消毒剂作不同稀释后,在一定条件下,一定时间内致死全部供试
球体细胞培养 1. 琼脂铺底的培养瓶:30ml无菌培养瓶,每瓶中加5 ml 2%琼脂培养基,冷却,形成平坦底层后备用。 2.取生长状态良好已连接成片的细胞,用弯头吸管伸入瓶内,把细胞纵横割划成若干小区后,倒出培养液。 3.加入0.25%的胰蛋白酶液,在倒置显微镜下边消化边观察,当细胞小区边缘微卷起后便立即终止消化,倒出消化液,用Hanks轻轻漂洗一次,加入新培养液3~5 ml,用吸管把已松动的细胞片吸打下来,分装入1~3个含2%琼脂培养基底层的培养瓶中,置温箱继续培养,数
(3)camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸转移酶,使G418(卡那霉素衍生物)失活。 (5)hygr:使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点,便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA
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