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- 2025年07月12日
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40
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Polyvinylidene Fluoride Membrane
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详见说明书
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上海抚生
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低温冷藏
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详见说明书
PVDF膜
英文名称：Polyvinylidene Fluoride Membrane
其他名称：二氟化树脂膜
包装：13.5×15cm/张
孔径：0.2um
性状(以下信息仅供参考)：聚偏二氟乙（PVDF）膜作为基质的转印膜由Millipore公司在1985年首先推出。
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)与硝酸纤维素膜相比，PVDF膜在蛋白质截留能力，机械强度和化学相容性上都更优越的性能（Pluskal,et al.,1986)。硝酸纤维素膜的典型结合量是80-100μg/cm2,而PVDF膜结合量是100-200μg/cm2（结合强度PVDF比硝纤膜强6倍）。在艾滋病毒（HIV）血清学检验中直接比较PVDF和硝酸纤维素膜，PVDF膜具有更好的截留总HIV抗原能力并提高抗体检测糖基化被膜抗原的性能。但是PVDF膜最大的优点不仅于此：更好的机械强度和化学耐受性使PVDF膜在各种染色应用和多重免疫检测中成为理想选择；而且单个凝胶的泳道复本可用于多种目的，如考马斯亮蓝染色后切出条带并进行N-末端测序、蛋白消化/肽分离/内部测序和免疫检测（Kurien,et al.,2003)。特别是需要做N端蛋白测序，在相当“严酷”的清洗条件下，当尼龙或者硝纤膜已经降解的情况下PVDF膜依然保持本色。所以PVDF也是要做蛋白测序的一选择。PVDF膜适用的检测方法也不少，化学发光、常规显色、同位素和标准染色都一样OK，但不适合荧光。PVDF膜特别注意的是需要100%甲预处理（不超过15秒）再用缓冲液平衡，才能用，而且适用过程中万一干了也要同样程序再处理（转膜后再这样处理可能会影响后继的抗体识别呢）。PVDF膜同样分0.45um和0.2um的，后者孔径小，对小分子蛋白有较好的拦截吸附，背景可能会比前者稍高
保存：RT，保质期7-10年
PVDF膜试剂间的干扰原因：
试剂中含有下一测试所要测定的底物，或是含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用，因而直接干扰下一反应的测定结果；
该试剂所引导的反应对下一项目的反应进程带来了间接的干扰，因为在有试剂污染的情况下，下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果。下面通过对试剂成分的分析和相应试验来找出试剂交叉污染可能带来的情况，进而指导相应的项目调整和结果分析
PVDF膜试剂间可能发生的干扰情况
1.ALT（IFCC）、AST（IFCC）试剂中含有高活力LD成分，有可能会对LD的测定带来干扰；
2.ALP（IFCC）、CK（NAC-activated）、CK-MB（NAC-activated）、CO2（PEPC）、α-Amy(EPS)等试剂中使用缓冲液，可能会对其后的Mg2+ 测定带来干扰；
3.ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、 α-HBDH(DGKC)等试剂使用缓冲液，可能会对无机磷的测定带来干扰；
4.CK（NAC-activated）、CK-MB（NAC-activated）试剂中含有Glu成分，其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反应过程，因此可能对Glu测定带来干扰，尤其对Glu的HK法测定可能带来严重干扰；
5.Mg2+试剂 (Calmagite)中含有EGTA成分，为Ca2+络合剂，可能对Ca2+的测定带来干扰；
6.个别试剂以甘油做酶的保护剂，因此可能对TG的测定带来干扰，等等；
7.低密度脂蛋白、甘油三酯、胆固醇的试剂成分中都含有CE、CHOD、POD酶，都会与血清成分反应，生成的中间反应产物是H2O2浓度,因为低密度脂蛋白和甘油三酯检测单位都是mmol/L级,而尿酸检测单位是μmol/L级,二者之间相差1 000倍,故检测尿酸的反应杯中只要残留极少量的低密度脂蛋白和胆固醇试剂就可产生大量的H2O2,直接导致尿酸的检测结果的升高；
8.葡萄糖对尿酸试剂的干扰GLU(OX)与UA测定原理均采用Trider's反应方法,试剂探针残留携带的GLU带入到UA反应体系,发生血糖反应其产物红色醌亚胺与UA产物红色醌亚胺颜色叠加,而血清中正常血糖含量远高于尿酸水平,从而导致UA结果严重偏高；
9.胆固醇(TC)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL) 会对总胆汁酸检测的影响，导致胆汁酸测定值增加。这些试剂中为了保证反应充分，往往含有胆酸钠成分或是一些脂类水解促进剂等，这些物质导致了样本胆汁酸测定的携带性增高及内源产物等副反应性增高；
10.谷丙中的含有的酮戊二酸NADH反应体系会干扰总胆汁酸检测中的Thio-NAD－Thio-NADH循环指示体系，导致测定值偏低；
由于各个试剂公司所提供的产品说明书常不能全面反映试剂的组成情况，所以通过实验发现试剂交叉污染可能带来的干扰变得很重要。下面以两个试验来加以说明:
A.将试剂作为样本进行全套项目测定，根据结果确定发生试剂交叉污染时造成直接干扰的项目。
B.将一份样本分为两份，一份加生理盐水或其他适当的稀释液，另一份加等量的试剂，同时测定、考察结果的变化，进而确定可能发生试剂交叉污染时造成干扰的项目。进行这一实验时，使用半自动生化分析仪可能会得到更为理想的结果，尤其是针对双试剂反应时， R1、R2加入时机可以得到更为精确的控制。
此外，由于试剂成分的复杂多样性，实时仪器状况的独特性，可能发生的试剂间的交叉污染的情况不尽相同。
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文献和实验Western杂交时，为确认蛋白是否转至PVDF膜上，可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。 1. 氨基黑染色 染液：0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid. 染色：将PVDF膜置于染液中染色数钟，ddH2O 脱色。 2. 考马氏亮蓝染色 染液：0.1% Coomassie Brilliant Blue R-250 (w/v) and 50% methanol (v/v
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，所以要增加WB的灵敏度和分辨率，提高所使用膜的纯度是个可以考虑的选择。如果NC膜搀杂一些醋化纤维素--这在前面已经提到，会影响蛋白质结合。Protran由于是纯NC膜，比较脆，机械耐受力欠佳，需要小心操作，如果担心自己“粗手粗脚”，那么就可以考虑一下Optitran或者Pall公司的以耐受力著称的BioTrace NT Nitrocellulose Transfer Membrane。卷膜肯定是最实惠的选择，只不过要自己动手裁剪--切记，必须带手套操作。 2. PVDF膜 与硝酸纤维素膜相比
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