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- 2025年07月14日
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详见说明书
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上海邦景
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详见说明书
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详见说明书
适用于平板法快速检测和计数食品、饮用水样品中的大肠杆菌。
【检验原理】
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源和微量元素，琼脂是培养基凝固剂；显色底物与大肠杆菌β-葡萄糖醛酸苷酶发生特异反应，水解底物，释放显色基团，使大肠菌群菌落显示绿色。
波尔顿选择性增菌肉汤添加剂培养操作步骤
1 、按、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液
2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ～ 24h ，选用有 30 ～ 200 个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。
总大肠杆菌 = 蓝绿色菌落
4 、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上， 36 ± 1 ℃培养 12-16 小时，挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验 ( 本公司有生化鉴定管套装 20 支 x3 种 )
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ～ 24h 小时:
波尔顿选择性增菌肉汤添加剂培养方法的局限性
该显色培养基鉴定大肠杆菌 ，少数情况下可能会出现假阳性，但不会出现假阴性，有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠杆菌典型菌落为蓝绿色，大肠菌群为无色菌落，其它细菌为无色或黄色菌落。
贮存
制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8℃，注意避光保存。
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ITCBroth
乳糖肉汤 Lactose Broth 用于食品中沙门氏菌检验前增菌
蛋黄粉 Egg yolk powder 250克 BR
BLB培养基250g/瓶用于双歧杆菌的分离培养incubationmediaBLB培养基250g/瓶用于双歧杆菌的分离培养
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波尔顿选择性增菌肉汤添加剂培养Egg-YolkSaltAgarBase
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DNA酶甲基绿琼脂基础于弯曲杆菌的DNA酶水解试验(GB标准)incubationmediaDNA酶甲基绿琼脂基础于弯曲杆菌的DNA酶水解试验(GB标准)
O/FMedium
波尔顿选择性增菌肉汤添加剂培养使用方法：
取一只无菌水样采集袋，拧开盖子，将所采集水样加至袋子500ml刻度线（为取样量标准在取样过程中，注意以下事项：1、手捏住瓶口颈部 2、轻轻抖动袋子使之充分张开 3、视线与500ml刻度线平行），拧紧盖子。
注意事项：使用时避免手指或其它物品浸染瓶口
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文献和实验于100mL亚硒酸盐肮氨酸（SC）增菌液内，于36±1℃培养18~24h。5.2 分离取增菌液1环，划线接种于一个亚硫酸铋琼脂平板和一个DHL琼脂平板。两种增菌液可同时划线接种在同一个平板上。于36±1℃分别培养18~24h（DHL）或40~48h（BS），观察各个平板上生长的菌落，沙门氏菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和沙门氏菌Ⅲ在各个平板上的菌落特征见表1。表1 沙门氏菌属各群在各种选择性琼脂平板上的菌落特征5.3 生化试验 5.3.1 自选择性琼脂平板上直接挑取数个可疑菌落，分别接种三糖铁琼脂。在三糖
原理将样品经增菌后划平板分离单菌落，挑取可疑菌落到胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤 (TPGY)培养基培养，对培养物用 DNA 提取试剂盒抽提 DNA，进行 PCR 扩增，用琼脂糖凝胶电泳检验 PCR 产物中是否含有肉毒杆菌的的特征条带，从而初步判断食品是否被肉毒杆菌污染。 二、仪器和试剂 紫外检测仪 NanoDrop1000 (Eppendorf)，台式微量冷冻离心机 Microfuge 22R（Beckman Counter），凝胶成像分析系统 Gel DocTM XR （Bio
1）样品制备过程分三步，共耗时24h：①选用营养肉汤进行预增菌（6h），使“致伤”、冷冻的沙门氏菌复苏。②使用选择性培养基RV进行增菌（14h），使沙门氏菌大量繁殖，同时抑制其它杂菌生长。③使用营养肉汤（蛋白胨水）进行后增菌（4h），使沙门氏菌的数量大大增加。比上述标准的ELISA法样品制备过程缩短了一半的时间。ELISA方法本身，则仅需要大约2h而已（其中30min是操作时间，90min是孵育时间）。相比之下，黎兆滚等人的方法可在27h内完成，比上述方法缩短了一半的时间。
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