人胚胎干细胞

一． 细胞特性

细胞名称：H9胚胎干细胞
生长特性：贴壁 球形克隆
种  属：人
货期（工作日）：5—7
培养难度：★ ★ ★ ★ (难度较高)


 

二． 培养条件

培养基：STEMCELL的mTSR1，人胚胎干细胞无饲养层培养基
温度：37℃     气相：95%空气,5% CO2
（细胞来源于上海市东方医院-国家干细胞资源转化中心）
 

三． 传代方式

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，每次传代48h后一天换一次；

2.待细胞克隆还没开始融合时，需要对其进行传代，传代比例为1:4；

3传代步骤：将1 mg/mL胶原酶IV消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加2 ml预热好的胶原酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化，前30min观察一次，之后每15min观察一次）一般孵育30-60min左右，消化好后加入5ml完全培养基。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，置于15ml离心管中，待细胞自然沉降后将上层Collagenase-type IV吸除，加入hES完全培养液5 ml，吹打2-3次，待细胞自然沉降后将上层培养液吸除。再加入培养液重悬细胞传代。每次传代后48h内不要移动。
 

四． 冻存条件

冻存条件：60%完全培养基+30%FBS（ES级）+10%DMSO
(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。)
长期存储：液氮

五． 供应限制

该产品仅供研究使用。
 

发货方式

我们采取两种形式的细胞发货方式：
  1. 复苏发货
                  a. T25瓶活细胞发货
                  b. 血清重悬发货

  2. 冻存管发货(干冰发货)
 对于采取冻存管方式发货的客户，为了保证可靠性我们会多发一管细胞(共2管)，干冰覆盖保温运输。

复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。

欢迎江浙沪地区的客户到实验室上门自取。


 

蒂科生物论文基金奖励方法

奖励对象：

使用HAKATA系列产品(HAKATA全系列：血清、冻存液、试剂、细胞株等)培养细胞并在中文核心期刊杂志或SCI期刊杂志发表文章，且文章中材料和方法栏中标注我公司品牌名或公司名(英文：HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China，中文:HAKATA或蒂科生物)
该奖励方案长期有效，欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦！
http://www.chuanqiubio.com/index.php?a=shows&catid=38&id=183


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