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上海联迈生物工程有限公司
- 服务名称:
外泌体提取
- 规格:
30
外泌体 DNA 分离是由不同细胞分泌的直径30-150nm 的胞外膜性囊泡(Extrocellular Visicles,EVs)。外泌体普遍存在于多种体液中,其内容物丰富,包括蛋白质、脂质和核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用。近年来,液体活检作为一种新的非侵入式主要检测血液中循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)和循环肿瘤DNA(Circulating Tumor DNA,ctDNA),获取患者肿瘤病变信息,用以帮助诊断治疗。研究表明,在外泌体中已检测到基因组DNA 和线粒体DNA,通过提取和检测外泌体中DNA突变,可作为液体活检的另一种选择。
外泌体提取和DNA分离试剂盒(Exosome Extraction & DNA Isolation Kit)结合我们的外泌体提取试剂,能够从细胞培养上清或体液(血清/血浆等)中同时分离外泌体和循环DNA。利用优化的裂解液提取已分离的外泌体DNA,采用吸附柱(Spin Columns)法方便、快捷地纯化、洗脱外泌体DNA,可直接用于下游应用,如real time PCR,Expression Array Assays,NGS等。
外泌体 DNA 分离产品特点:
可获得回收率、高纯度游离DNA和外泌体相关DNA。
操作简单、快捷,不需要额外仪器设备。
可小体积洗脱。
适合后续各种DNA实验,如qPCR或数字
产品应用:
可简单、快速富集各种样本中游离DNA和外泌体颗粒。
可通过DNase I处理降解样本中游离DNA,而外泌体中DNA不受影响,可单独纯化外泌体中DNA。
可应用qPCR或数字PCR检测和发现突变,应用于液体活检。
外泌体 DNA 分离提取的DNA可用于构建文库及测序。
收集临床诊断为肠癌患者,应用“外泌体提取和DNA分离试剂盒”中外泌体提取试剂沉淀血浆中外泌体颗粒,分别经过Dnase I处理和不经过Dnase I处理来区分提取的外泌体相关DNA,应用安捷伦2100 Bioanalyzer测定DNA分布图(图1),从中得出:外泌体提取试剂不仅能富集血浆中外泌体颗粒,同时血浆中游离DNA也能被沉淀下来,经过Dnase I消化,可以降解血浆中游离DNA,但外泌体膜性结构可阻止Dnase I对外泌体内含物DNA消化。以提取的DNA为模板,应用ARMS-PCR技术对KRas突变检测(图2),在KRas突变的肠癌患者中,检测的Ct值较健康人小,同时经过Dnase I处理,可提高肠癌患者与健康人Ct值差值(△Ct)检测的特异性和灵敏度。
外泌体 DNA 分离外泌体提取和DNA/RNA分离纯化方面积累了丰富经验,结合我们的实验条件,可以提供:
1、外泌体的提取和纯化,外泌体定量(NTA和ELISA)。
2、外泌体核酸分离和纯化,外泌体核酸检测(qPCR或NGS)。
3、外泌体蛋白质鉴定,如Western Blot,蛋白质质谱分析等。
外泌体提取和DNA分离试剂盒(Exosome Extraction & DNA Isolation Kit)结合我们的外泌体提取试剂,能够从细胞培养上清或体液(血清/血浆等)中同时分离外泌体和循环DNA。利用优化的裂解液提取已分离的外泌体DNA,采用吸附柱(Spin Columns)法方便、快捷地纯化、洗脱外泌体DNA,可直接用于下游应用,如real time PCR,Expression Array Assays,NGS等。
外泌体 DNA 分离产品特点:
可获得回收率、高纯度游离DNA和外泌体相关DNA。
操作简单、快捷,不需要额外仪器设备。
可小体积洗脱。
适合后续各种DNA实验,如qPCR或数字
产品应用:
可简单、快速富集各种样本中游离DNA和外泌体颗粒。
可通过DNase I处理降解样本中游离DNA,而外泌体中DNA不受影响,可单独纯化外泌体中DNA。
可应用qPCR或数字PCR检测和发现突变,应用于液体活检。
外泌体 DNA 分离提取的DNA可用于构建文库及测序。
收集临床诊断为肠癌患者,应用“外泌体提取和DNA分离试剂盒”中外泌体提取试剂沉淀血浆中外泌体颗粒,分别经过Dnase I处理和不经过Dnase I处理来区分提取的外泌体相关DNA,应用安捷伦2100 Bioanalyzer测定DNA分布图(图1),从中得出:外泌体提取试剂不仅能富集血浆中外泌体颗粒,同时血浆中游离DNA也能被沉淀下来,经过Dnase I消化,可以降解血浆中游离DNA,但外泌体膜性结构可阻止Dnase I对外泌体内含物DNA消化。以提取的DNA为模板,应用ARMS-PCR技术对KRas突变检测(图2),在KRas突变的肠癌患者中,检测的Ct值较健康人小,同时经过Dnase I处理,可提高肠癌患者与健康人Ct值差值(△Ct)检测的特异性和灵敏度。
外泌体 DNA 分离外泌体提取和DNA/RNA分离纯化方面积累了丰富经验,结合我们的实验条件,可以提供:
1、外泌体的提取和纯化,外泌体定量(NTA和ELISA)。
2、外泌体核酸分离和纯化,外泌体核酸检测(qPCR或NGS)。
3、外泌体蛋白质鉴定,如Western Blot,蛋白质质谱分析等。
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文献和实验相关实验
外泌体(Exosomes)作为细胞分泌到胞外的一种囊泡,参与不同细胞间 DNA、RNA、蛋白质等分子的传递,起到了细胞间的通讯作用。近些年,很多学者都在探索外泌体在各个研究领域中扮演的角色和功能,但是由于外泌体的不易获得性,使得很多方向的外泌体研究举步维艰。 在神经系统中,由于脑脊液难以得到,要想获得脑部直接来源的外泌体则难度较大,所以从脑组织中分离外泌体对于神经系统研究人员迫在眉睫。 且目前外泌体的分离方法很多只适用于液体样本,不太适合直接分离组织。所以我们一直立足文献[1]并积极优化
培养细胞的工作,另一方面利用肿瘤组织提取得到的外泌体,可能更接近于生理状态下的外泌体,也有利于研究外泌体的功能。 重点来了!那如何从肿瘤组织中分离提取外泌体呢,效果又如何?下面和大家分享我们自己从肿瘤组织中提取外泌体的效果,供大家参考: 一、采用消化+滤筛过滤+超离法从肿瘤组织中分离外泌体: 将肿瘤组织切成小块,加入胶原酶孵育,再经过滤筛过滤,随后进行一系列的差速超速离心过程,包括除杂、超离等,最终用 PBS 重悬外泌体,用重悬后的外泌体进行接下来的透射电镜(TEM)、纳米粒径跟踪
本部分介绍了外泌体分离的 4 种具体方法与外泌体鉴定的 3 种具体途径,并包含了外泌体组学分析、外泌体示踪及功能等知识点的讲解。
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外泌体 DNA 分离
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