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根据对培养组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
(1)天然培养基。天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。例如培养细菌常用的肉汤蛋白胨培养基:牛肉膏3g,蛋白胨5g,水1000mL。
用做这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源广泛,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基和大生产上的培养基。
这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响,另外自养微生物一般不能在其上面生长。
(2)合成培养基。合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。例如培养细菌的葡萄糖铵盐培养基:C6H12O60.2%,K2HPO40.7%,KH2PO4 0.3%,Na3C6H5O70.05%,MgSO4·7H2O0.01%,(NH4)2SO40.1%,H2O 100mL。
这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。
(3)半合成培养基。在合成培养基中,加入某种或几种天然成分;或者在天然培养基中,加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马铃薯蔗糖培养基等。如果在合成培养基中加入琼脂,由于琼脂中含有较多的化学成分不太清楚的杂质,故也只能算是半合成培养基。这种培养基在生产实践和实验室中使用最多。
类杆菌-胆汁-七叶苷(BBE)琼脂图片按培养基的物理状态区分
培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
用于微生物分离,鉴定,计数。如图,微生物分离成菌落、菌苔。图中为大肠杆菌菌落,是用涂布平板法得到。
用于分离微生物的固体培养基
用于分离微生物的固体培养基
(2)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
用于观察微生物运动特征。如图,左侧试管中微生物不运动,而右侧试管中微生物运动,因而两试管中现象不同
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
(3)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业。
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録血琼脂基础 250g 用于副溶血性弧菌的溶血试验(GB标准)
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文献和实验异变形杆菌的VP试验和MR试验常同为阳性。 6.胆汁七叶苷水解试验 (1)原理:在10%~40%胆汁存在下,测定细菌水解七叶苷的能力。七叶苷被细菌分解生成的七叶素,七叶素与培养基中的枸橼酸铁的二价铁离子发生反应形成黑色化合物。 (2)方法:将被检菌接种于胆汁七叶苷培养基中,35℃孵育18~24h后,观察结果。 (3)结果:培养基完全变黑为阳性,不变黑为阴性。 (4)应用:主要用于鉴别D群链球菌与其它链球菌的区别,以及肠杆菌科的某些种、某些厌氧菌(如脆弱拟杆菌等)的初步鉴别。D群链球菌本试验
为阴性。(4)应用:主要用于大肠埃希菌和产气肠杆菌的鉴别。本试验常与MR试验一起使用,一般情况下,前者为阳性的细菌,后者常为阴性,反之亦然。但肠杆菌科细菌不一定都这样规律,如蜂房哈夫尼亚菌和奇异变形杆菌的VP试验和MR试验常同为阳性。6.胆汁七叶苷水解试验(1)原理:在10%~40%胆汁存在下,测定细菌水解七叶苷的能力。七叶苷被细菌分解生成的七叶素,七叶素与培养基中的枸橼酸铁的二价铁离子发生反应形成黑色化合物。(2)方法:将被检菌接种于胆汁七叶苷培养基中,35℃孵育18~24h后,观察
ml 400g/L KOH,轻轻振摇试管30s至1min,然后静置观察结果。 (3)结果:红色者为阳性,黄色或类似铜色为阴性。 (4)应用:主要用于大肠埃希菌和产气肠杆菌的鉴别。本试验常与MR试验一起使用,一般情况下,前者为阳性的细菌,后者常为阴性,反之亦然。但肠杆菌科细菌不一定都这样规律,如蜂房哈夫尼亚菌和奇异变形杆菌的VP试验和MR试验常同为阳性。 6.胆汁七叶苷水解试验 (1)原理:在10%~40%胆汁存在下,测定细菌水解七叶苷的能力。七叶苷被细菌分解生成的七叶
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