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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
大量
- 靶点:
Antithrombin III
- 克隆性:
多克隆
- 抗体英文名:
Anti-Antithrombin III
- 抗体名:
抗凝血酶3抗体
- 标记物:
HRP/AKP等
- 宿主:
人、小鼠、大鼠、兔等
- 适应物种:
人、小鼠、大鼠、兔等
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体或固体
- 应用范围:
WB IHC-P IHC-F IF
- 保存条件:
低温冻存
- 规格:
100ul
英文名:Anti-Antithrombin III
价格:电询
我司提供各种科研所需的抗体,包括一抗、二抗、抗原,单克隆抗体、多克隆抗体以及标记抗体等,同时我们也提供定制服务以及抗体标记服务,具体详情可点击这里咨询!
免疫-PCR技术:
1、基本原理
免疫-PCR主要由两个部分组成即类似于普通酶联免疫吸附实验(ELISA)的抗原抗体反应和常规的PCR扩增和电泳检测。以一段特定的双链或单链DNA来标记抗体,用PCR扩增抗体所连接的DNA,并进行电泳检测,因此可由PCR产物的量来反映抗原分子的量。免疫-PCR结合了抗原抗体反应的特异性和PCR的高度敏感性,成为一种极为敏感的抗体依赖的抗原检测技术。
2、免疫-PCR的改进
将不同的抗体标上特异的DNA序列,形成一种新的、基于双抗夹心免疫模式的免疫-PCR,并可同时检测多种抗原,避免了免疫实验敏感性的限制和在一个实验中检测抗原的种类。免疫-PCR夹心模式可以用常规的免疫实验完成。这样就大大降低了原先免疫-PCR实验的复杂性,并减少了大量的操作时间。这种免疫-PCR系统的关键改进就是用异双功能化学关联剂制备标记DNA-抗体偶联物。
3、多分析物免疫-PCR
抗凝血酶3抗体制备过程如下:
(1)氨基修饰寡核苷酸与SATA反应,形成乙酰硫代乙酰修饰DNA。
(2)Sulfo-SMCC与抗体反应,形成马来酰亚胺修饰抗体。
(3)混合马来酰亚胺修饰抗体和乙酰硫代乙酰修饰DNA,并加入羟胺盐酸,在黑暗条件下反应,使抗体和标记DNA偶联。
(4)反应混合物用HPLC凝胶过滤纯化偶联物,收集的偶联物在4℃下保存。
在多分析物免疫-PCR实验中,几千个bp的dsDNA可以通过生物学和生物化学方法制备。通过PCR和单向缺失在以Puc18为基础的重组质粒上制备了各种长度、具有相同引物序列的的dsDNA,选择适合长度的dsDNA作为特异性抗体的标记物。而且dsDNA比ssDNA具有更高的稳定性。此外,长链DNA分子更容易用荧光标记和光吸收检测,并且可以引入更多的非同位素标记,序列长度的提高可以促进杂合检测。
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文献和实验有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。 (一)用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清,用于免疫的动物应适龄
抗酶抗体的优点,在于酶和抗体结合时,不需要通过化学交联剂交联,抗体的失活少。在酶复合物形成后,同时就具有酶的活性,遇到相应的底物即呈现催化显色作用。必须注意,抗酶抗体必须用与第一抗体同种来源的动物制备。 于家兔的两个后足掌内各注入弗氏完全佐剂 ( 含活卡介苗 12mg/ml) 和过氧化物 (5mg/ml) 的等量混合乳化液 0.5ml ,两星期后,于两侧腘淋巴结内注入同样液体。一周后静脉注射 0.2ml~0.4ml ,过氧化物酶液 ( 同样浓度
(一)抗原制备 Ig是免疫球蛋白,对异种动物而言,是良好的抗原物质。可以刺激异种动物产生抗Ig血清,经适当提取后,产生抗Ig抗体,又叫第二抗体或抗抗体。在多数的间接标记反应中,均需制备抗Ig抗体。 (二)材料与 试剂 1.提取的动物Ig 2.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂 3.青霉素和链霉素 4.实验动物 兔 5.其它材料及 试剂
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