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试剂间的干扰:
1、低密度脂蛋白、甘油三酯、胆固醇的试剂成分中都含有CE、CHOD、POD酶,都会与血清成分反应;
2、葡萄糖对尿酸试剂的干扰GLU(OX)与UA测定原理均采用Trider's反应方法,试剂探针残留携带的GLU带入到UA反应体系,发生血糖反应其产物红色醌亚胺与UA产物红色醌亚胺颜色叠加;
3、胆固醇(TC)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL) 会对总胆汁酸检测的影响,导致胆汁酸测定值增加;
4、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)试剂中含有Glu成分,其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反应过程,因此可能对Glu测定带来干扰,尤其对Glu的HK法测定可能带来严重干扰;
5、Mg2+试剂 (Calmagite)中含有EGTA成分,为Ca2+络合剂,可能对Ca2+的测定带来干扰;
6、个别试剂以甘油做酶的保护剂;
7、ALT(IFCC)、AST(IFCC)试剂中含有高活力LD成分;
8、LP(IFCC)、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)、CO2(PEPC)、α-Amy(EPS)等试剂中使用磷酸缓冲液,可能会对其后的Mg2+ 测定带来干扰;
9、ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、 α-HBDH(DGKC)等试剂使用磷酸缓冲液,可能会对无机磷的测定带来干扰;
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文献和实验并混匀,注意避免气泡产生。 E、在加入Ac-特异性多肽-pNA混匀后,37℃孵育2~4 h。发现颜色变化较明显时即可测定OD405。如果颜色变化不明显可适当延长孵育时间,甚至可孵育过夜。 F、用酶标仪或分光光度计(100 μL比色皿)在λ=405 nm或400 nm测定样本吸光值。 G、通过计算OD样本值/OD阴性对照的倍数来确定凋亡诱导剂组Caspase 3的活化程度。 四、结果判断 Caspase的活性与AC-特异性多肽-pNA的分解量强弱成正比。 参考
Transformation of E. coli by Electroporation
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