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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
大量
- 靶点:
APRG1
- 克隆性:
多克隆
- 抗体英文名:
Anti-APRG1
- 抗体名:
三号染色体开放阅读框抗体
- 标记物:
HRP/AKP等
- 宿主:
人、小鼠、大鼠、兔等
- 适应物种:
人、小鼠、大鼠、兔等
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体或固体
- 应用范围:
WB IHC-P IHC-F IF
- 保存条件:
低温冻存
- 规格:
100ul
英文名:Anti-APRG1
价格:电询
我司提供各种科研所需的抗体,包括一抗、二抗、抗原,单克隆抗体、多克隆抗体以及标记抗体等,同时我们也提供定制服务以及抗体标记服务,具体详情可点击这里咨询!
免疫-PCR技术:
1、基本原理
免疫-PCR主要由两个部分组成即类似于普通酶联免疫吸附实验(ELISA)的抗原抗体反应和常规的PCR扩增和电泳检测。以一段特定的双链或单链DNA来标记抗体,用PCR扩增抗体所连接的DNA,并进行电泳检测,因此可由PCR产物的量来反映抗原分子的量。免疫-PCR结合了抗原抗体反应的特异性和PCR的高度敏感性,成为一种极为敏感的抗体依赖的抗原检测技术。
2、免疫-PCR的改进
将不同的抗体标上特异的DNA序列,形成一种新的、基于双抗夹心免疫模式的免疫-PCR,并可同时检测多种抗原,避免了免疫实验敏感性的限制和在一个实验中检测抗原的种类。免疫-PCR夹心模式可以用常规的免疫实验完成。这样就大大降低了原先免疫-PCR实验的复杂性,并减少了大量的操作时间。这种免疫-PCR系统的关键改进就是用异双功能化学关联剂制备标记DNA-抗体偶联物。
3、多分析物免疫-PCR
三号染色体开放阅读框抗体制备过程如下:
(1)氨基修饰寡核苷酸与SATA反应,形成乙酰硫代乙酰修饰DNA。
(2)Sulfo-SMCC与抗体反应,形成马来酰亚胺修饰抗体。
(3)混合马来酰亚胺修饰抗体和乙酰硫代乙酰修饰DNA,并加入羟胺盐酸,在黑暗条件下反应,使抗体和标记DNA偶联。
(4)反应混合物用HPLC凝胶过滤纯化偶联物,收集的偶联物在4℃下保存。
在多分析物免疫-PCR实验中,几千个bp的dsDNA可以通过生物学和生物化学方法制备。通过PCR和单向缺失在以Puc18为基础的重组质粒上制备了各种长度、具有相同引物序列的的dsDNA,选择适合长度的dsDNA作为特异性抗体的标记物。而且dsDNA比ssDNA具有更高的稳定性。此外,长链DNA分子更容易用荧光标记和光吸收检测,并且可以引入更多的非同位素标记,序列长度的提高可以促进杂合检测。
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文献和实验长度为1450bp即483个密码子,最长的是位于XII号染色体上的一个功能未知的开放阅读框(4910个密码子),还有极少数的开放阅读框长度超过1500个密码子。在酵母基因组中,也有编码短蛋白的基因,例如,编码由40个氨基酸组成的细胞质 膜蛋白 脂质的PMP1基因。此外,酵母基因组中还包含:约140个编码RNA的基因,排列在XII号染色体的长末端;40个编码SnRNA的基因,散布于16条染色体;属于43个家族的275个tRNA基因也广泛分布于基因组中。 表1 酵母染色体
有效的技术使得酵母基因组中约6000个基因中的任何一个基因均能被突变的等位基因取代,甚至从基因组中完全缺失,这种方法具有很高的效率和准确性。(5)酵母的基因组很小,比如酿酒酵母的单倍体就含有16条200-2200kb的线性染色体,DNA容量仅为大肠杆菌的3.5倍。通过完整的基因组测序其基因组大小为12068kb,编码5885个专一性蛋白质的开放阅读框。而裂殖酵母的基因组大小尽管与酿酒酵母相近,但仅分布在3条染色体上,编码4824个蛋白质。这意味着在酵母基因组中平均每隔2kb就存在一个编码蛋白质的基因
全基因组分析 对多种微生物物种的全基因组序列的研究揭示了大量关于微生物物种的生理和进化方面的信息,这为传染性疾病的诊断和治疗提供了新的方法。其中一个主要的发现是:大约每个物种都有半数的开放阅读框的功能是未知的(Fraser等,2000)。通过测定其功能的实验阐明,这些新基因的功能可能会发现新的生化通路、新的毒力决定簇等。从那些用计算机模拟可以确定生物学功能的基因有可能重建一个给定生物赖以生存的所有主要代谢通路。通过详细地分析它的运输机制,这些代谢
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