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ELISA检测服务
荧光定量PCR检测服务
免疫荧光实验检测服务
免疫沉淀和免疫共沉淀检测服务
免疫组化实验--IHC检测
免疫印迹实验--Western blotting
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多抗制备
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如何保证生化检测结果的准确:
1. 室内质控:
开展常规项目的室内质量控制,绘制质控图和观察室内环境;
2.谨慎使用检测方法学:
在使用某一方法时,先虑标本量是否太少或血清凝固,需重新处理标本进行测定;如果是采用速率法,要考虑是否是酶活力过高;动态反应曲线是否正常,注意有无提示数据报警;
3.仪器因素:
仪器方面,如果发现某一时间的结果全部偏低,就要考虑是否引入了系统误差,是否发生仪器的样品针堵塞,搅拌棒搅拌不均等情况,或样品针注射器漏气,或试剂的交叉污染,或光源灯老化等问题。
4.标本状态:
避免标本的溶血或脂血现象。
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文献和实验SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)
⑥1ml注射器及6号长针头 ⑦微量注射器(10μl或50μl) ⑧水泵或油泵 ⑨真空干燥器 ⑩培养皿(直径120mm) 2.试剂: (1)标准蛋白质 目前国内外均有厂商生产低分子量及高分子量标准蛋白质成套试剂盒,用于SDS-PAGE测定未知蛋白质分子量。 ①高分子量标准蛋白试剂盒(Pharmacia公司产品,表中16-1)。 表16-1 5种标准蛋白质 同时按说明书要求处理 ②
分光光度计;玻璃比色皿一套;考马斯亮蓝G250; 牛血清蛋白;超纯水。 1.2 试液的制备: 牛血清蛋白标准溶液(1000ug/ml)的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加入超纯水溶解并定容。 考马斯亮兰G250 试剂 称取100mg考马斯亮兰G250,溶于50ml95%的乙醇后,加入120ml85%的磷酸,用水稀释至1升。 2. 结果与讨论 2.1 校正曲线的绘制 准确吸取1000ug/ml牛血清蛋白标准
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 注意:在准备做磷酸(酯)酶实验的时候,不加磷酸酯酶抑制剂。 一、工作液配制 配制 100 ml 的 modified RIPA buffe: 1.称取 790 mg 的 Tris-Base,加到 75 ml 去离子水中,加入 900 mg 的 NaCl,搅拌
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