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- 2025年07月12日
- WB IHC-P IHC-F IF
- 人、小鼠、大鼠、兔等
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海邦景
- 库存：
大量
- 靶点：
APG4B
- 克隆性：
多克隆
- 抗体英文名：
Anti-APG4B
- 抗体名：
自噬相关蛋白4B抗体
- 标记物：
HRP/AKP等
- 宿主：
人、小鼠、大鼠、兔等
- 适应物种：
人、小鼠、大鼠、兔等
- 亚型：
IgG
- 形态：
液体或固体
- 应用范围：
WB IHC-P IHC-F IF
- 保存条件：
低温冻存
- 规格：
100ul
英文名：Anti-APG4B
价格：电询
我司提供各种科研所需的抗体，包括一抗、二抗、抗原，单克隆抗体、多克隆抗体以及标记抗体等，同时我们也提供定制服务以及抗体标记服务，具体详情可点击这里咨询！
免疫-PCR技术：
1、基本原理
免疫-PCR主要由两个部分组成即类似于普通酶联免疫吸附实验（ELISA）的抗原抗体反应和常规的PCR扩增和电泳检测。以一段特定的双链或单链DNA来标记抗体，用PCR扩增抗体所连接的DNA，并进行电泳检测，因此可由PCR产物的量来反映抗原分子的量。免疫-PCR结合了抗原抗体反应的特异性和PCR的高度敏感性，成为一种极为敏感的抗体依赖的抗原检测技术。
2、免疫-PCR的改进
将不同的抗体标上特异的DNA序列，形成一种新的、基于双抗夹心免疫模式的免疫-PCR，并可同时检测多种抗原，避免了免疫实验敏感性的限制和在一个实验中检测抗原的种类。免疫-PCR夹心模式可以用常规的免疫实验完成。这样就大大降低了原先免疫-PCR实验的复杂性，并减少了大量的操作时间。这种免疫-PCR系统的关键改进就是用异双功能化学关联剂制备标记DNA-抗体偶联物。
3、多分析物免疫-PCR
自噬相关蛋白4B抗体制备过程如下：
（1）氨基修饰寡核苷酸与SATA反应，形成乙酰硫代乙酰修饰DNA。
（2）Sulfo-SMCC与抗体反应，形成马来酰亚胺修饰抗体。
（3）混合马来酰亚胺修饰抗体和乙酰硫代乙酰修饰DNA，并加入羟胺盐酸，在黑暗条件下反应，使抗体和标记DNA偶联。
（4）反应混合物用HPLC凝胶过滤纯化偶联物，收集的偶联物在4℃下保存。
在多分析物免疫-PCR实验中，几千个bp的dsDNA可以通过生物学和生物化学方法制备。通过PCR和单向缺失在以Puc18为基础的重组质粒上制备了各种长度、具有相同引物序列的的dsDNA，选择适合长度的dsDNA作为特异性抗体的标记物。而且dsDNA比ssDNA具有更高的稳定性。此外，长链DNA分子更容易用荧光标记和光吸收检测，并且可以引入更多的非同位素标记，序列长度的提高可以促进杂合检测。
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文献和实验抗体纯化：SPA-sepharose cl-4b 亲合层析法
一、原理葡萄球菌a蛋白（SPA）具有与多种哺乳动物IgG分子fc段结合的能力，并与不同IgG亚类的结合力有所差别。改变pH及离子强度可洗脱结合于SPA-sepHarose cl-4b 柱上的IgG或不同的IgG亚类，可直接纯化血清或小鼠腹水中的IgG抗体。二、试剂器材1、spa-sepharose cl-4b （pharmacia-sigma）2、磷酸缓冲液0.1mol/l pH8.6＋0.02% NaN33、枸橼酸缓冲液0.1mol/l pH5.5 0.1mol/l pH
利用SPA-sepharose cl-4b 亲合层析法分离纯化IgG抗体
亚类，可直接纯化血清或小鼠腹水中的IgG抗体。 二、试剂器材 1、spa-sepharose cl-4b (pharmacia-sigma) 2、磷酸缓冲液 0.1mol/l pH8.6+0.02% NaN3 3、枸橼酸缓冲液 0.1mol/l pH5.5 0.1mol/l pH4.0 0.1mol/l pH3.0 分别+0.02% NaN3 4、1mol/l pH9.0 tris-HCl溶液 5、再生缓冲
自体吞噬是细胞中一种降解和再生细胞组分的基本细胞过程，词语「autophagy」源自希腊词语「auto-」和吞噬（phagein），前者意思是「自我」(self)，而后者的意思则是「去吃」，而自噬表示的就是「自己把自己吃掉」（self eating）；自体吞噬这种概念是 20 世纪 60 年代提出来的，当时科学家们首次观察到细胞能够通过将自身内容物裹入到膜结构中来破坏内容物，从而形成袋装的囊泡结构，这种囊泡结构能够被运输到再循环小泡结构中进行降解，这种小泡结构称之为溶酶体，研究这种现象的困难
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