耐热性重组单链DNA连接酶溶液

基因工程的操作步骤和几个重要概念

的 DNA 闯进受体细胞，受体细胞就会把它「消灭」。当外来的 DNA 进入大肠杆菌时，大肠杆菌内部的内切酶就会使其「粉身碎骨」。因此，目的基因的直接导入往往不通。在这种情况下，生物工程师们就要采用 DNA 重组技术。首先将目的基因与质粒经过内切酶的「裁剪」，然后靠连接酶的作用，将目的基因和质粒（或病毒 DNA）重新组合起来形成重组 DNA。 重组 DNA 就能在质粒（或病毒 DNA）的「带领」下进入受体细胞。基因工程的操作步骤包括 4 步：获取目的基因、重组 DNA、将拼好的 DNA 送入受

手把手教你做好体外 DNA 重组

方法【实验原理】DNA 连接酶可以在两个双链 DNA 分子相邻的 5'-磷酸与 3'-羟基之间形成磷酸二酯键，从而可以实现重组 DNA 分子的构建。一般在连接反应之前，DNA 分子都要进行限制性内切酶消化，使待重组的 DNA 分子具有相匹配的末端，黏性末端连接和平齐末端连接是最常用的，但不匹配的末端也可以经过修饰实现连接。下面以质粒 DNA 为载体，介绍目的 DNA 片段与载体的连接。黏性末端的连接涉及三种情况：①载体和 DNA 片段经双酶切后，两端具有不同的粘端，可以直接进行连接反应。②载体和 DNA

这几类 PCR 技术你知道吗？

出来并混合在一起。象手动热启动方法一样，蜡防护层法比较烦琐，易于污染，不适用于于高通量应用。 Platinum DNA 聚合酶对于自动热启动 PCR 来说方便高效。Platinum Taq DNA 聚合酶的成分为复合有抗 Taq DNA 聚合酶单克隆抗体的重组 Taq DNA 聚合酶。此酶在常温下活性被封闭，要在 94℃－ 95℃ 下加热数分钟才能够恢复酶活性。同经化学修饰用于热启动的 Taq DNA 聚合酶相比，Platinum 酶不需要在 94℃ 延时保温（10 到 15 分钟）以激活聚合