3-氨基邻苯二甲酰肼/鲁米诺

化学发光免疫分析新技术

酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂, 操作步骤与酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶标记生物活性物质（如酶标记的抗原或抗体） 进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物, 在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶（HRP） 和碱性磷酸酶（AL P） , 它们有各自的发光底物。     　　2. 2. 1　HRP 标记的CLEIA     　　常用的底物为鲁米诺（32氨基邻苯二甲酰肼

中性粒细胞杀菌功能的检测―全血化学发光测定法

基本原理 过氧化物生成系统在杀菌过程中起重要作用。中性粒细胞被激活时，其NADPH氧化酶亦被活化，发生氧化还原反应，形成过氧化离子，随后通过超氧化物歧化酶（SOD）将其转变为H2O2 ，参入细胞内杀菌。H2O2 在过氧化物酶作用下，形成次氯酸和卤化物是另一种杀菌机理。 过氧化离子不稳定，在其分解过程中可激活鲁米诺（氨基苯二酰-肼）类物质，并使之发生荧光，通过生成荧光的强度可直接或者间接地测知过氧化离子生成的情况，即中性粒细胞细胞内杀菌能力。本法是氧化爆发检测中最为敏感，并可直接

蛋白质印迹

的底物5-溴-4-氯吲哚磷酸盐（BCIP）转化为蓝色的产物；而辣根过氧化物酶可以以H2O2为底物，将3-氨基-9-乙基咔唑氧化成褐色产物或将4-氯萘酚氧化成蓝色产物。另一种检测辣根过氧化物酶的方法是用增强化学发光法，辣根过氧化物酶在H2O2存在下，氧化化学发光物质鲁米诺（luminol，氨基苯二酰一肼）并发光，在化学增强剂存在下光强度可以增大1000倍，通过将印迹放在照相底片上感光就可以检测辣根过氧化物酶的存在。除了酶连二抗作为指示剂，也可以使用其它指示剂，主要包括以下一些：I125标记的二抗