流式抗体标记试剂盒，如FITC，Alexa Fluor® 5

Lightning-Link^® 偶联试剂盒的工作原理是什么？

标记化学的靶点是赖氨酸和蛋白质 N 端的伯胺。所有抗体均有多个游离胺基，而大多数蛋白质都有赖氨酸和/或 α-胺基。只需用移液枪将抗体或生物分子滴入含目标标记物的冻干混合物瓶，孵育 3 小时（Lightning-Link^® 系列）或 15 分钟（Lightning-Link^® Fast 系列）左右。

虽然实验方案看起来很简单，但 Lightning-Link^® 偶联过程却十分复杂，它可以在无抗体损耗的情况下，快速生成可重复生成的偶联抗体，从而节省您的宝贵时间和资源。

可以标记什么？

只要存在赖氨酸残基或游离的反应伯胺，就可以使用 Lightning-Link^® 偶联试剂盒标记一抗、二抗以及蛋白、多肽和其他生物分子。

此类试剂盒已经优化，可用于标记 IgG；如需标记非抗体分子，建议调整加入到偶联试剂瓶的试剂用量，优化实验方案。这样将有助于解释不同类型分子之间的分子量差异以及赖氨酸残基含量。但须确保添加到试剂瓶的总体积不变，以免偶联效率降低。

如需了解有关非抗体分子偶联的更多信息，请查看这份指南。

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预期回收率是多少？

Lightning-Link^® 偶联试剂盒的整个抗体标记反应在同一试管中完成，无需进行分离步骤。这意味着偶联过程结束时，抗体回收率可达 100%。偶联过程不会造成抗体聚集，并且在生理 pH 下进行。反应完成后，通常可以直接使用偶联抗体，无需进一步纯化。

Lightning-Link^® 和 Lightning-Link^®（Fast）有什么区别？

整个过程中，两种试剂盒都只需要 20 - 30 秒的手动操作时间即可生成偶联抗体。

但是，Lightning-Link^®（Fast）试剂盒的偶联和淬灭孵育时间更短：总共只需 15 分钟，而 Lightning-Link^® 系列则需要 3 个小时。

偶联抗体最终的品质相同。

能否用 2 种不同的 Lightning-Link^® 标记物偶联同一个抗体？

不能。Lightning-Link^® 偶联试剂盒只能使用一种标记物（单一标记物）标记抗体。所有试剂盒都靶向抗体的同一个化学基团（游离胺）。因此，在双标记物实验中，两种不同的标记物会争相标记同一个位点。我们无法保证这类实验能够成功。

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试剂盒能否定制？

数据表提供了不同规格的试剂盒，可供购买。如果没有您想要的规格，请联系我们的技术支持团队，告知您的需求。我们的定制试剂盒最大规格为 100 mg。

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偶联反应的缓冲液、试剂和条件：

使用 Lightning-Link^® 偶联试剂盒进行偶联反应过程中，赖氨酸基团和标记物之间会形成共价键。一些缓冲液和添加剂会干扰偶联反应或者与偶联反应产生竞争，因此，偶联之前一定要对此有所了解。

偶联之前是否需要纯化抗体？

需要。抗体标记化学涉及游离胺基。由于大部分蛋白质/多肽都有赖氨酸和/或 α-胺基，所以，溶液中的所有蛋白质/多肽都会被标记。我们建议您先纯化抗体，然后再进行偶联或使用纯化抗体。腹水、血清或杂交瘤培养基会干扰偶联，应避免使用。