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试剂间的干扰:
1、低密度脂蛋白、甘油三酯、胆固醇的试剂成分中都含有CE、CHOD、POD酶,都会与血清成分反应;
2、葡萄糖对尿酸试剂的干扰GLU(OX)与UA测定原理均采用Trider's反应方法,试剂探针残留携带的GLU带入到UA反应体系,发生血糖反应其产物红色醌亚胺与UA产物红色醌亚胺颜色叠加;
3、胆固醇(TC)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL) 会对总胆汁酸检测的影响,导致胆汁酸测定值增加;
4、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)试剂中含有Glu成分,其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反应过程,因此可能对Glu测定带来干扰,尤其对Glu的HK法测定可能带来严重干扰;
5、Mg2+试剂 (Calmagite)中含有EGTA成分,为Ca2+络合剂,可能对Ca2+的测定带来干扰;
6、个别试剂以甘油做酶的保护剂;
7、ALT(IFCC)、AST(IFCC)试剂中含有高活力LD成分;
8、LP(IFCC)、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)、CO2(PEPC)、α-Amy(EPS)等试剂中使用磷酸缓冲液,可能会对其后的Mg2+ 测定带来干扰;
9、ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、 α-HBDH(DGKC)等试剂使用磷酸缓冲液,可能会对无机磷的测定带来干扰;
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文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活,必须了解酶催化反应总的反应式,而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量,使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
的调节,以适应内外环境的变化。代谢方向、速率的调节,大半有赖于所谓关键酶,如葡萄糖的降解代谢,需通过糖酵解三羧酸循环和呼吸链酶等进行,经过几十次反应,方才得到最终产物,二氧化碳和水。每一个反应都有专一的酶进行催化,这些反应环环相扣构成一个整体,代谢调节往往是通过控制代谢途径中催化某一个或几个关键环节的酶来实现的。代谢调节大致可以分为以下几种方式。 通过酶的合成进行调节 例如,大肠杆菌通常利用葡萄糖作为碳源,但当培养基中只有乳糖存在的情况下,乳糖能诱导此菌合成能够水解乳糖为半乳糖和葡萄
大肠杆菌产生能分解乳糖为半乳糖和葡萄糖的β-半乳糖苷酶,从而使乳糖得以利用(见操纵子)。高等生物也有这种能力,如在饥饿状态下糖异生途径较活跃,此时该代谢途径中丙酮酸羟化酶的合成量增加了10倍。 区域化 真核细胞含有膜包裹着的多种细胞器,使各种酶和酶系被隔离在细胞的不同区域。如糖酵解、戊糖磷酸途径和脂肪酸合成的酶系存在于胞液中;而脂肪酸氧化、三羧酸循环和氧化磷酸化等过程在线粒体中进行。像糖异生和尿素合成这些过程又依赖胞液和线粒体两个区域中的反应相互影响。一些特定分子的命运依赖它们存在
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