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上海抚生
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10MG
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文献和实验至10mg/ml,用前放100。C水浴中煮沸变性10min,冰水骤冷。尽可能将袋中气泡赶尽,可封口器将袋口封住。将杂交袋浸入68。C水浴保温3~12h。当预杂交液温度升至68。C时,在滤膜表面常会形成小气泡。轻轻晃动袋中液体即可除去这些小气泡,这一点对于保证滤膜表面充分浸润预杂交液很重要。 4.杂交 从水浴中取出塑料袋,用剪刀剪开一角,尽可能挤净预杂交液。用吸管或大枪头将杂交液加入袋中,用恰好是足量的液体保持滤膜湿润(50μl/cm2)。溶液的组成是6×SSC,0.01mol/l
核酸提取(The Extraction of Nucleic Acid)
f管(2ml,1.5ml,0.5ml),Eppendorff管架。 3.DNA提取的相关试剂: 1)蛋白酶K(10mg/ml),-20℃保存。 2)TE(pH 8.0):10mmol/L Tris.Cl(pH 8.0),1mmol/L EDTA(pH 8.0), 15磅高压灭菌后室温保存。 3)10% SDS:10g SDS溶于90ml 水中,加热68℃助溶,加几滴浓盐酸调节pH至7.2,加蒸馏水定容至100ml,室温保存。 4)3M NaAc: 800ml水中溶解408
。 5.BSA溶液的配置方法? 牛血清白蛋白就是我们常说的BSA. 牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别,它不是一定的,是多聚物,有的地方测的70 000,这就是一个数据了。在做PCR的时候会用到它。 是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白
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