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- 百奥莱博
- MQ0079-CQX
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
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559
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长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
干粉状态可在0~4℃条件下低温保藏。溶解后分装为适当体积，-20℃
- 规格：
1g/100g
特别提示：包括重组蛋白酶K在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：重组蛋白酶K
产品规格：1g/100g
1.产品简介
蛋白酶K是一种非特异性蛋白内切酶，该酶属丝*酸类蛋白酶，可以切割脂肪族*基酸、疏水性*基酸和芳香族*基酸羧基端连接的酯键和肽键。分子量大小为29.3 kDa(单体)，在pH4到pH12的条件下均有活性，在SDS、尿素或EDTA存在时亦很稳定。它能够切割脂族*基酸和芳香族*基酸的羧基端肽键，用于生物样品中蛋白质的降解。此酶经脱色和色谱纯化去除了RNA和DNA，也检测不到其它杂酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力，其水解的最小多肽是四肽分子。
2.产品优势
纯度高：无其他杂酶活性：酶切反应无其他副反应，收率高
比活高：比活不低于30 U/mg蛋白
电泳纯度：SDS-PAGE电泳鉴定，99%以上
稳定：冻干粉，易于储存和运输
3.产品用途
主要用在基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶，也可以于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白质的杂质，譬如DNA疫苗和肝素的制备等，还可制备脉冲电泳的染色体DNA及蛋白质印迹。
4.产品特性
来源：林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)
分子量：理论MW：29.3kDA
活性单位定义：37℃、pH 7.5条件下，每分钟可水解底物酪蛋白生成1 μmol酪*酸的蛋白酶K 的量，定义为一个单位(U)
储存：干粉状态可在0~4℃条件下低温保藏。溶解后分装为适当体积，-20℃贮存
稳定性：运输可在室温下进行
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文献和实验蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta（以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
[ 实验目的 ] 通过本实验学习 PCR 反应的基本原理与实验技术。 通过本实验学习重组质粒的检测技术。 [ 基本原理 ] 聚合酶链反应（ polymerase chain reaction ， PCR ）是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种技术。在待扩增的 DNA 片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后， DNA 扩增 2 n 倍。 PCR 进行的基本条件是： （ 1 ）以 DNA 为模板（在 RT － PCR 中模板是 RNA ）； （ 2 ）以寡核苷酸
蛋白酶 K，威力巨大的广谱蛋白酶，95C 加热10 分钟，则完全失活。数年前首次使用它，是替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头，效果不错；后来又用于处理 RNase-Free的水，效果也是一级棒。从此就再也不用 DEPC 了。现在将它的细节公开，与大家分享。 配制 RNA 裂解试剂时，直接用灭菌的双蒸水配制，最后，加入蛋白酶 K 至终浓度 1ug/ml。轻轻混匀，室温放置 15 分钟后即可。枪头及离心管去除 RNase：先将枪头及离心管清洗干净后，移入预先混好的含 1ug
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