冻存样本核蛋白提取试剂盒

特别提示：包括冻存样本核蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：冻存样本核蛋白提取试剂盒
英文名称：Cryopreserved sample nucleoprotein Extraction Kit
产品规格：50T/100T

冻存样本核蛋白提取试剂盒适用于从各种经过冻存的细胞和各种实体组织中提取核蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白纯度高，较少交叉污染。
提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便。将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
2．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝*酸蛋白酶、半胱*酸酸蛋白酶、天冬*酸蛋白酶、丙*酰-*基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法：
1．提取液制备：每 200μl冷的蛋白提取液A和B中分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．样本解冻后，取适量组织样本(细胞样本直接进行第4 步)，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆①至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨)，冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
3.在 4℃，1000×g条件下离心2-3分钟，弃上清。
4．每 100mg组织样本或50μl细胞压积中加入200μl冷的提取液A，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。
5．再次高速涡旋振荡 5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。
6．沉淀用 PBS 洗涤一次，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟，弃上清。
7.在沉淀中加入 100μl冷的提取液B，高速涡旋振荡15秒。
8．置冰上 40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。
9.在 4℃，16000×g条件下离心10分钟。
10．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
11．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。