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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)
- 保存条件:
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)
- 供应商:
上海研卉生物科技有限公司
- 库存:
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)
- 规格:
20T
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)
Cat. No. / ID: 77023
Performance
此外,Bioanalyzer分析显示,exoRNeasy和传统超速离心方法分离得到的大RNA和小RNA长度和产量相似(参见exoRNeasy isolates small and large RNAs from extracellular vesicles in plasma)。
通过RT-qPCR实验对exoRNeasy纯化的RNA产物和exoEasy分离柱流出液进行分析,结果显示,exoRNeasy的产物包括血浆中所有mRNA,包括细胞外囊泡的miRNA,且不含细胞(参见exoRNeasy captures all mRNA and vesicle-specific miRNAs in plasma)。
Principle
Procedure
在exosomes纯化步骤,预过滤的血浆(不包含大于0.8 μM的微粒)与Buffer XBP混合,加至exoEasay亲和性膜离心柱上,结合到柱上。使用Buffer XWP洗涤结合在膜上的囊泡,之后使用QIAzol裂解。
在RNA分离步骤,在QIAzol洗脱液中加入氯仿,回收水相,将其与乙醇混合。包括miRNA在内的总RNA结合到离心柱上,洗涤三次后洗脱。
Applications
Supporting data and figures
exoRNeasy isolates small and large RNAs from extracellular vesicles present in plasma.
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文献和实验沉淀。 5、开封后的 ECS 试剂有沉淀出现是否可以继续使用? 答:沉淀物如果是结晶状,建议 56 度水浴摇晃混匀。如果结晶消失,则可以继续使用,少量沉淀不影响提取效果。 6、乳液提取试剂盒加 solution B 之后无豆花状固体,此时是否可以继续实验? 答:不可以,必须在明确看到豆花状沉淀,溶液变透明后才可进行下一步操作。此时需要继续加入适量 solution B,并在 37 度水浴加热,直至看到豆花状沉淀。 7、如何选择血清和血浆样本来进行外泌体研究? 答:血清和血浆都是常见的外泌体样本
我们选取几种常见的样本分别介绍样本处理的要求: 细胞培养上清:选用这种样本的优势是不会受到样本量的限制,但是需要注意以下几点:一是一定不能添加含有外泌体的 FBS;二是细胞一般培养 24-48h 后即可分离外泌体;三是注意细胞不允许有污染、细胞死亡率要控制在 5% 之内。 血清/血浆:选用血液作为样本时,要注意血清和血浆的区别。血清是血液凝固之后收集的液体,如果研究与血小板相关的疾病,选用血清作为样本比较合适;血浆是血液去除了血细胞之后得到的液体,一般情况下选择血浆更合适。尽量在采血 30min
分化、肿瘤侵袭、促血管新生等生理过程,与多种疾病的发生和进程密切相关。 由于外泌体的特殊结构和功能,使得它具有潜在的应用价值,一方面可以作为诊断多种疾病的生物指标,另一方面也可以作为治疗手段,未来有可能作为药物的天然载体用于临床治疗。 三、如何分离外泌体? 外泌体的样本来源主要有细胞培养上清、血清/血浆、尿液、腹水、乳汁、脑脊液、唾液、滑液等,其中细胞培养上清、血清/血浆、尿液是最常见的来源。如果是使用细胞培养上清,要注意细胞培养中一定不能添加 FBS
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