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大量
- 英文名:
Aggregatibacter actinomycetemcomitans
- 保质期:
1-2年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
斜面菌种:1-2个月。冻干菌种:5-10年
- 规格:
冻干粉一支
伴放线放线杆菌
资源名称 伴放线放线杆菌(暂无)
种属 Aggregatibacter actinomycetemcomitans
分离基物 来自加纳的18岁男性移民牙周炎菌斑,丹麦
安全等级 1
模式菌株 no
应用领域 血清B型
培养方法
培养基 TSA+5%脱纤维羊血:胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g,大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g,氯化钠 5.0g,琼脂 15.0g,pH7.3±0.2。121℃,15min。灭菌后无菌条件添加5%脱纤维羊血。
生长条件 37℃,5%CO2
收到菌株操作:
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
伴放线放线杆菌低温存法
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
伴放线放线杆菌脱水存法
①沙土保存法,能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合,经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2~3次,烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子,用无菌蒸馏水2~2.5ml制成孢子悬液,吸取少许加入沙土管中,经真空抽干,外观呈松散状态,于4℃冰箱保存,保存期可达5~7年。
② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂(一般用脱脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管内于-20~-30℃的乙醇浴中速冻。然后,在低温下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻,熔封安瓿管,于低温下保存。保存期可达5~10年之久。
③ 石蜡油封存法,在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低温干燥处保存,此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。
伴放线放线杆菌特别注意事项
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时与我公司联系或更换新的菌种。
使优良菌种的性状保持稳定,人为地创造条件,使菌种的新陈代谢活动处于不活泼状态,即选取优良菌种的休眠体(孢子或芽孢)或富有生命力的悬浮液在低温或脱水状态下保存。
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文献和实验为丝状。粘液型菌株有荚膜,毒力较强。菌落一般为光滑型,若与金黄色葡萄球菌在BAP上共同孵育,则在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大,这叫做“卫星现象”。原因是金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子,促进流感嗜血杆菌的生长。 放线杆菌属为革兰阴性杆菌,有时呈球形、椭圆形(见图3)。兼性厌氧菌,无动力,无荚膜,在含血清或血液的培养基上生长良好,37℃培养2~3天后形成直径约1mm的菌落。在肉汤培养液中生长呈颗粒状。对人或动物致病的有伴放线放线杆菌、林氏放线杆菌和马驹放线杆菌。伴放线放线杆菌
的化学结合的方法更为方便。 这些方法中分析物:标记物恒定1:1的摩尔比非常适合与研发超灵敏的检测方法。融合蛋白已经被用于基于BRET的开放式三明治式BL免疫检测(OS-BLIA),此方法以被证明比基于FRET的检测方法更为灵敏。这种方法是依赖于抗原的抗体重链和轻链的重聚,其分别与Rluc或EYFP融合。 CL 和 BL现在已经越来越多的在蛋白分析的western杂交中使用。例如球蛋白(显性)印迹检测和利用免疫印迹检测牙龈缝流体中伴放线放线杆菌的IgG抗体亚型。
h后与标准板对照读取NHI结果,并记录在电脑上由电脑分析结果 7.同时作手工药敏:配制0.5麦氏单位浊度该菌液,用棉签均匀涂于HTM平板上,5min后贴相应药敏纸片(根据NCCLS标准选择药敏纸片),24h后测量抑菌环大小并报告药敏结果 附:数据库 伴放线放线杆菌 Actinobacillis actinomycetemco 粘膜炎布兰汉菌 Branhamella catarrhalis 人类心杆菌 Cardiobacterium hominis
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