GIBCO I 型胶原酶用于细胞和组织的解离

大鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养

体外培养模型已被广泛应用于血脑屏障的研究、脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究、新药筛选、脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究等领域。而大多数体内实验采用大鼠为动物模型，而且大鼠具有较多的细胞生物学研究所需的抗体可用，因此进行大鼠脑微血管内皮细胞的培养具有重要的意义。自从Panula等[2]首次成功培养大鼠脑微血管内皮细胞以来，国内外有关大鼠脑微血管内皮细胞的分离和培养方法已有较多的报道，我们发现国内的方法多以组织匀浆、两次尼龙网过滤分离脑微血管段为主[3,4]，也有采用酶消化、梯度离心及尼龙网过滤

血清使用问题的总结

变形后，吸出胰酶直接加入适量的hanks液或者全培，这个量看自己的喜好和吹打细胞方便而定。一般都可以中止消化的。不会存在继续消化的事情。如果是从组织上消化细胞做原代培养，我一般都使用全培进行中止，而且加的很多，0.25%的胰酶，用10%血清，按1:2的比例应该是足够的。当然全培是2，一般我养细胞的时候，会用国产的比较便宜的血清配制全培，专门用于中止消化，这样有几个好处：一是中止消化的效果应该好于hanks液吧，再是也有利于维持细胞活性。而且这部分液体会被离心去掉，血清便宜，离心掉了不会心疼。而养细胞

小心翼翼还是养不好细胞？师兄说了一个让我惊呆的原因

NaHCO3，因此应该匹配 10% CO2。02 HEPESHEPES 和其他有机缓冲液可以有效调节培养基 pH，适用于多种细胞系。实际上，某些标准培养基配方包含 HEPES。但是，HEPES 可能会有毒性，尤其是对某些已分化细胞，所以使用前需首先评估其效果。03 酚红酚红可作为培养基的 pH 指示剂。酚红在低 pH 时显示黄色，在高 pH 时则显示紫色。绝大多数组织培养时，pH 为 7.4，应显示为微红色。04 L - 谷氨酸钠L - 谷氨酰胺是所有哺乳动物细胞和昆虫细胞的必需氨基酸。与其它氨基酸相比