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文献和实验一、目的要求1.学习电泳原理和技术。2.学习和掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术。二、原理聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(N,N-methylene-bisacylamide,简称Bis)在加速剂N,N,N,N-四甲基乙二胺(N,N,N,N-tetramethyl ethylenedia mine,简称TEMED)和催化剂过硫酸铵[ammonium persulfate(NH4)2S2O8,简称AP)或核黄
一、目的要求1.学习电泳原理和技术2.学习和掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术二、原理聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(N,N—methylene-bisacylamide,简称Bis)在加速剂N,N,N,N—四甲基乙二胺(N,N,N,N—tetramethyl ethylenedia mine,简称TEMED)和催化剂过硫酸铵(ammonium persulfate (NH4)2S2O8,简称AP)或核黄
聚丙烯酰胺的特性,包括机械性能,弹性,透明度,孔径大小取决于T,C,T是两个单体(单体丙烯酰胺和N-N’-甲叉双丙烯酰胺)的总百分浓度,C是与总浓度有关的交联百分比浓度。 T=(a+b)/m C=b/(a+b) (a为单体丙烯酰胺的克数,b为N-N’-甲叉双丙烯酰胺的克数,m为缓冲液终体积) a,b的比例很关键,如果a:b 小于10,胶脆,硬 如果a:b 大于100,胶糊状。 一般有弹性,透明的胶,a:b比例应在30。一般的胶联度是随着T的增加而降低的,在5%-20%交联
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