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- 百奥莱博
- ZN2928-WOA
- 北京
- 2025年08月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
459
- 英文名：
Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Mouse (FITC)
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
4℃
- 规格：
400T|800T|1600T
特别提示：包括免疫荧光试剂盒(小鼠源IgG型一抗)(FITC)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：免疫荧光试剂盒(小鼠源IgG型一抗)(FITC)
英文名称：Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Mouse (FITC)
产品规格：400T|800T|1600T
本试剂盒采用SABC系统，是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-FITC代表了传统的免疫荧光方法。荧光具有简便快速,不需显色既可直接观察的优点。但染色不能保存，敏感性较低是其缺点。将链霉亲和素—生物素引入荧光系统，能明显提高敏感性及降低背景。FITC 激发光波长为 490-495nm，发射光波长为 520-530nm，呈黄绿色荧光。
试剂盒组成：
| 组分 | 规格 |
| 正常浓缩山羊血清(效价1:10) | 2.5ml/5ml/10ml |
| 生物素标记羊抗小鼠IgG(效价1:100～200) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
| SABC-FITC(效价1:100～200) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
另附有三个滴瓶可供稀释试剂用
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
石蜡片染色步骤：
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭：滴加稀释的正常血清封闭液(稀释比1:10)，室温20分钟，甩干，勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗，37℃孵育 1～2小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记羊抗小鼠IgG(参考效价1:100-200),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC- FITC(参考效价1:100-200)，37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4 次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察。
建议：
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954，与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验大鼠海马体神经元和活体大鼠脑注射 α 突触核蛋白后做的免疫细胞化学和免疫组化分析。 原代大鼠海马体神经元被 1 型突触核蛋白前体原纤维（SPR-322）4 µg/mL（D-F）处理后显示路易体内含物的形成，而当被 2 型突触核蛋白前体原纤维（SPR-317）4 µg/mL（A-C）处理时没有路易体内含物形成。组织：原代海马体神经元，物种：斯普拉-道来氏大鼠，固定：由 PFA 制作的 4% 甲醛。一抗：小鼠抗 pSer129 抗体, 稀释度 1:1,000，4 °C 下处理 24 小时；二抗
FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如，在实验设计时，选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗，相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时，由于两种一抗种属来源不同，可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗，滴加二抗时，先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育，洗涤后，滴加SABC-Cy
性免疫球蛋白产生交叉反应， 例如：检测小鼠样本蛋白，则不应选择小鼠或大鼠源的一抗，最好选兔源的一抗，则二抗则可选择偶联了检测分子（酶、荧光素、生物素等）的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况，除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法，则抗体宿主物种的影响不大，如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测。 尽管如此，含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白，还原变性样本中含IgG，在western blot 检测中则结合
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