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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
818
- 英文名:
Ultra sensitive Immunohistochemistry Kit (anti-rabbit&mouse IgG)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
3ml|6ml|12ml|50ml
特别提示:包括超灵敏抗小鼠/兔IgG免疫组化试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:超灵敏抗小鼠/兔IgG免疫组化试剂盒
英文名称:Ultra sensitive Immunohistochemistry Kit (anti-rabbit&mouse IgG)
产品规格:3ml|6ml|12ml|50ml
本试剂盒采用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上,形成类似于章鱼的超大分子抗体-酶聚合物,替代传统方法中的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力,同时有很强的组织细胞渗透力,特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单,快速,高敏感,低背景等特点。本试剂盒适于一抗来源为兔和小鼠的抗体。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 5%BSA封闭液 | 3ml/6ml/12ml |
| 聚合HRP标记抗兔/小鼠IgG | 3ml/6ml/12ml |
| 3%H2O2 | 3ml/6ml/12ml |
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 石蜡切片,常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性。PBS冲洗,5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加5%BSA封闭液,37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(兔/小鼠IgG),37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5分钟×3次。
6. 滴加聚合 HRP 标记抗兔/小鼠IgG, 37℃孵育30分钟,PBS冲洗,5分钟×3次。
7. 显色液显色,镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)或AEC(ZN1963)。自来水充分冲洗。
8. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5-2分钟。脱水,透明。
9. 选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验的继发电子的能力,因此,不仅可以用于透射电镜的超薄切片观察,也可以用于扫描电镜对细胞表面的抗原、受体进行标记定位观察。金标液无毒性,对人体无损伤。胶体金及胶体金标记物的制备见第五章 第3节 。在原位分子杂交技术在电镜水平的应用中,胶体金的标记术被科技工作者认为是当前最理想的标记物。一、电镜水平的免疫金染色法应用于电镜水平的免疫法,可分为包埋前染色和包埋后染色,由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差,一般只用于细胞表面的抗原标记,如需穿透细胞膜,则需辅以冻融法或加入Triton X-100、皂素等活性
这个标记内参的10次使用装) 图示: A-G分别表示不同实验小鼠心脏蛋白(上样量50ug),兔抗小鼠Akt抗体(康成生物Cat#KC-5A01)检测心脏组织匀浆中Akt水平。加入兔二抗(康成生物Cat#KC-RB-035,稀释比例为1:5,000)时同时加入HRP标记的抗GAPDH单抗(稀释比例为1:10,000,康成生物Cat#KC-5G5)。采用化学发光试剂盒(康成生物Cat#KC-420)及X胶片曝光显影。一次反应即可同时检测目的蛋白(Akt)与内参GAPDH的含量。
在电镜水平应用较为广泛,因该法具有特异性中、灵敏度高、方法简便和背景染色淡等优点。蛋白A的免疫特异性在第五章已作了介绍,PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性,又能保持高度的稳定性,PAg复合物分子最小易于穿透组织。 1、蛋白A-金(PAg)复合物的制备(Slot和Geuze,1981) (1)胶体
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