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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
细胞核/胞浆分离试剂盒
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃避光保存,避免反复冻融。孵育缓冲液2-8℃保存
- 规格:
50T/100T
细胞核/胞浆分离试剂盒
产品概述
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细胞核/胞浆分离试剂盒储存条件: 提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。 有效期: 一年。 产品简介: 细胞核/胞浆分离试剂盒可以从哺乳动物细胞中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统,维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆,而几乎没有交叉污染。 本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能,适合下游分析如转录活性,RNA拼接,gel-shift分析,报告分析,酶活性分析和WB等。
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文献和实验,首先使用 Invent 柱式法胞质胞核分离试剂盒将样品分为胞浆蛋白和胞核蛋白,每组按照胞浆组分,胞核组分顺序分别上样,使用 GAPDH 作为胞浆内参,LaminA/C 作为胞核内参,验证胞质胞核分离成功无交叉污染。 检测目标蛋白 NF-ĸB p65,验证了过表达 circ-Sirt1 的血管平滑肌细胞(VSMCs)中,TNF-ɑ 诱导的 NF-ĸB p65 的核易位被显著抑制,并伴有促炎细胞因子和黏附分子表达减少(图 E)。相反,敲低内源性 circ-Sirt1 增强了 TNF-ɑ 诱导的 NF-ĸB
分离后通过免疫沉淀或免疫印迹检测细胞内特定蛋白质的移动。例如,对某个细胞系中某个对质膜蛋白转运有影响的特殊因子感兴趣,可以用这个因子处理细胞,处理后的细胞通过离心富集。然后将处理过的细胞和没有处理过的细胞分别分离成不同组分。许多传统方法和商业试剂盒可以将细胞/组织分离成亚细胞结构例如胞浆,质膜,细胞器和细胞核。通过使用特异性抗体免疫印迹对比目标膜蛋白的分布。这种研究方法的基本要求是分离出的亚细胞组份必须相对干净。在市场上有许多细胞组分分离试剂盒,但是通常都具有显著的交叉污染,所以仔细选择细胞组分分离试剂盒
。 图 1. 富集质膜组分后检测跨膜蛋白更易检出:目的蛋白 SGL1 是跨膜蛋白,使用总膜蛋白检测困难,使用柱式法质膜及细胞组分分离试剂盒富集质膜后再检测质膜组分,可以显著提高 SGL1 的检出效率。 (图片来源:Kashiwagi Y,2015,PLoS ONE 10(6):e0130605. doi:10.1371/journal.pone.0130605.) (3)有条件诱导目的蛋白表达 如果通过增溶目的蛋白或分离亚细胞结构富集目的蛋白,仍无法得到 WB 条带,可通过查阅相关
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