DAB显色试剂盒蓝色(IHC)

特别提示：包括DAB显色试剂盒蓝色(IHC)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：DAB显色试剂盒蓝色(IHC)
英文名称：DAB Peroxidase Substrate Kit for IHC (Blue Color)
产品货号：SY0761
产品规格：1Kit

DAB 即二氨基联**（3,3’-diaminobenzidine），辣根过氧化物酶（Peroxidase）最常用的生色底物，在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化和积累，形成浅棕色不溶性产物，在加金属镍盐的情况下，不仅增强了显色强度，而且使显色呈鲜艳的蓝色，适用于免疫组化及各种印迹显色法。本试剂盒采用液体性滴瓶包装，使用方便，并且减少了接触有潜在毒性的DAB。

产品组份：

20×DAB浓缩液————3ml
20×H2O2浓缩液————3ml
20×TBS缓冲液（含氯化*）————3ml

操作方法
1）抗原-过氧化物酶标记抗体复合物形成后，对组织用TBS 或PBS充分洗涤，5min/次，共4次。
2）往1ml 蒸馏水加显色剂A，B，C 各1滴，混匀后即得到完整的DAB工作液。加至标本上。一般显色10-30min。若无背景出现则可继续显色。
3）显色后蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时核固红复染5min左右。水洗。
4）中性树胶封片，显微镜观察。

储存条件：-20℃，有效期一年。

除了DAB显色试剂盒蓝色(IHC),，我公司还供应以下相关产品：



名称：DyLight 405抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
货号：YT116
规格：>300次
本试剂盒含有DyLight 405标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)抗体，可以用于检测小鼠来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的蓝色。DyLight 405是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。它比绝大部分常用的蓝色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而且背景更低。由于很多荧光检测仪器缺少400nm左右的激发波长，DyLight 405常局限于激光共聚焦显微镜下观察。DyLight 405的吸收峰400nm、发射峰421nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

试剂盒组份：
抗小鼠DyLight 405 ———————30μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

名称：4%多聚甲*溶液(含DEPC)
货号：ZN1869
规格：500ml
产品用途：组织细胞的固定
使用方法：将组织置于4%多聚甲* 4℃固定，固定时间与组织厚度成正比，约1mm/小时，固定液的量约为组织体积的20倍以上。
描述：DEPC是内源性RNA酶抑制剂，它可以抑制组织离体时内源性RNA 酶的活性，以防止其对RNA的降解。添加有DEP的多聚甲*固定液固定的组织既可以用来做免疫组化，也可以用来做原位杂交，不添加的一般只能用于免疫组化。
附加说明：
含DEPC，推荐用于原位杂交等需检测核酸的实验，也可用于免疫组化，细胞凋亡(Tunel)等实验；
为了您的健康，请带口罩手套，在通风橱内操作。

名称：超敏化学发光底物(A液+B液)
货号：ZN1944
规格：1盒
产品保存：4℃密封避光保存，一年有效
产品说明：Western blot 底物发光检测试剂是一种高灵敏度的增强型化学发光底物试剂，采用独特的发光底物系统，并对成份进行了优化。产品背景低，稳定性好，信号的灵敏度及强度高，发光时间持久。比普通 ECL 试剂敏感度高数十倍。用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP的抗体及其关联的抗原。可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对×光胶片曝光，也可直接进行 lμminometer 检测或者荧光 CCD 扫描。
产品特点：
1．高信噪比，背景低。
2．发光迅速。
3．可在日光灯下进行发光操作。
4．灵敏度高：可检测 femto 级抗原。
5．发光持续时间长，可进行反复曝光，进行结果优化，而不需重复 Western blot。
6．节约抗体，包括一抗二抗。超敏化学发光检测试剂因灵敏度高，可使用较高抗体稀释比例。一抗稀释 1:1000-1:5000或0.2-1.0μg/ml ；二抗稀释 1:20000-1:100000或10-50ng/ μl。
使用方法：
1．执行常规 SDS－PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。
2．膜的封闭:用 TBS-T 液洗涤印迹膜 10minX2。放入 5%脱脂奶粉封闭液内，摇床震动，室温封闭1小时。
3．一抗孵育：去除封闭液，并加入稀释好的一抗，用摇床震动，室温孵育2h或4℃孵育过夜。
注意：最好使用推荐的一抗稀释比例，稀释一抗使用封闭液稀释。
4．用 4-6倍 TBS-T洗涤印迹膜，10minX3。增加洗液量，和/或洗膜的次数可降低背景。
注意：洗涤之前，用 TBS-T洗液将印迹膜进行简单的漂洗，将会增加洗膜的效果。
5．二抗孵育：将一抗孵育后的印迹膜放入适当稀释的HRP 标记的二抗中孵育，摇床震动，室温孵育2 小时。
注意：最好使用推荐的HRP 标记二抗的稀释比例，稀释二抗使用封闭液稀释。
6．重复第 4 步，以去除非特异性 HRP 标记二抗的结合。
注意：与 HRP 标记二抗孵育后，必须彻底地清洗印迹膜。
7．制备工作液：按每 1 ml 蒸馏水加 A 液和 B 液各 50μι，混匀组成作液即可使用。用量以充分覆盖印迹膜为基准。每10cm2膜需要大约1ml工作液。
8．将印迹膜有蛋白的一面朝上平整的铺在一张平板上，加上配好的发光底物工作液。
9．将印迹膜与工作液孵育1-5min。
注意：孵育的时间可以在暗室里观察，以判断是否进行胶片曝光。
10．将一洁净的保鲜膜或透明的玻璃纸平整的铺在孵育有工作液的印迹膜上，只要保鲜膜或透明的玻璃纸比较大可以不用吸除多余的工作液，轻轻赶出其间的气泡。
11．在暗室中取一张×胶片小心置于膜上，曝光 5 秒至 1分钟，立即显影定影。
注意：根据其发光的强度,缩短或延长×片的曝光时间(对微弱信号，曝光时间可延长至数小时),或者曝光一系列不同的时间后再显影定影挑选一张满意的。也可用合适的照相器材直接记录蛋白膜的化学发光图像。工