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- 2025年07月15日
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上海徕创生物科技有限公司
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细胞转染实验
常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（持久性转染）。
瞬时转染指外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，虽然可以达到高水平的表达，但通常只持续几天，在转染后24-72小时内分析结果。
稳定转染指外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白，需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选，筛选得到的细胞可稳定表达目的蛋白，用于蛋白的扩增及富集；或得到稳定沉默特定基因的细胞株。
徕创细胞转染服务价格与周期：
| 服务编号 | 服务项目 | 价格 | 服务周期 |
| LC-XB003 | 瞬时转染及药物浓度筛选 | 询价 | 1-2周 |
| LC-XB004 | 单克隆细胞株筛选及鉴定 | 询价 | 7-10周 |
| LC-XB005 | 多克隆细胞系筛选及鉴定 | 询价 | 7-10周 |
瞬时转染
接收质粒、细胞，细胞培养，转染，WB检测。
稳定转染
接收质粒、细胞，细胞培养，转染，抗生素筛选，得单克隆细胞株，扩倍，检测冻存。
徕创客户须知：
宿主细胞；真核表达载体；
瞬时转染：完整的实验报告；构建成功的质粒及甘油菌及详细的信息；
稳定转染：完整实验报告；剩余质粒；详细的稳定细胞系筛选原始数据(实验流程，图片)
徕创生物服务承诺：
客观、公正、可信的实验结果。
徕创生物为您提供分子生物学领域技术服务，各类服务均得到客户高度认可，且反馈良好。
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文献和实验转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定，是进行各种后续研究(如 RFLP 分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。 实验目的： 掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤 实验原理： 1. 转膜的方式： 向上的毛细管转移 向下的毛细管转移 同时向两张膜转移 电转移
细胞转染 方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，是目前转染效率最高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点。 需要指出的一点，无论采用哪种转染 技术，要获得最优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态，到转染方法的操作细节，都需要考虑。 一、细胞
基：含血清或不含血清的，用于转染细胞的正常培养。 二、操作步骤 (一)克隆目的基因 1、根据GenBank检索的目的基因序列，设计扩增引物，并在上、下游引物的5’-端分别引入酶切位点BamHⅠ和XhoⅠ，行RT-PCR。 2、回收特异性扩增片段，连入T载体。 3、转化DH5α，质粒制备。 4、酶切初步鉴定，测序证实。 (二) 真核重组表达载体的构建： pcDNA3载体带有在大肠杆菌中复制的原核序列
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