封闭液(用TBS配置，含曲拉通X-100)

特别提示：包括封闭液(用TBS配置，含曲拉通X-100)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：封闭液(用TBS配置，含曲拉通X-100)
英文名称：Blocking Buffer(TBS)
产品货号：YT876
产品规格：100ml

本品是最新一代的快速高效封闭液，总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品，可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等实验中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品配制在TBS中，含有适当浓度Triton X-100。 按照每张膜封闭需要5-10ml封闭液计算，一个包装的本产品 可以封闭10-20张膜。

本封闭液快速高效。封闭时间通常仅需5-15分钟，并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速 封闭液相比，显示出更强的信噪比(参考下图)。

本封闭液封闭后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白，确保极高的信噪比。

本封闭液兼容性好，兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂，不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素，不会干扰基于生物素的检测。

本封闭液使用灵活。本产品配制在含有适当浓度Triton X-100的TBS中，可以直接用于相关实验，但也可以根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一抗或二抗的稀释。

本产品与BSA及国外同类产品的封闭效果对比参见下图。在相同样品和实验条件下，仅封闭液及封闭时间存在如下图所示的差异时，我公司的本封闭液封闭后的整体背景明显低于BSA封闭后的背景，而且目的条带亮度明显高于国外同类品牌产品。


每组实验从左到右依次为：5μl蛋白Marker，2.5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液，5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液。请注意对于抗体A，本封闭液比BSA和国外同类产品具有更低 的背景，并且和国外同类产品相比信号明显更强。对于抗体B，本封闭液比BSA具有更低的背景，和国外同类产品相比信号明显更强。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

注意事项：
1. 本产品推荐仅使用一次，重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比很高的一抗，例如一些内参抗体，本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用 过的封闭液混合。
2. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外，如有特殊需要，也 完全可以4℃封闭过夜。
3. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验，可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
4. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子，并仅轻轻夹取其边角，操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
5. PVDF膜一经浸润和活化，需一直保持湿润，根据Western进行到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中，否则可能会产生难以封闭的异 常背景。

储存条件：4℃，有效期一年。

除了封闭液(用TBS配置，含曲拉通X-100),，我公司还供应以下相关产品：



名称：PVDF膜活化浸润液
货号：YT065
规格：250ml
本品是一种绿色环保、无毒无害的用于快速浸润和活化PVDF膜的溶液，并且浸润活化后的后续处理非常便捷。一个包装的本产品可以用于约75-100张常规尺寸PVDF膜(约6.6×8.5cm)的浸润和活化。

本产品安全无毒，不含剧毒的甲*或其它的有毒有害试剂，只需数秒时间就可以把疏水的PVDF膜充分浸润和活化。并且浸润活化后的PVDF膜只需简单地用转膜液洗涤数秒，即可被转膜液快速平衡并用于后续的转膜等实验。

PVDF膜是western blot实验中最广泛使用的转移介质之一，由于其在蛋白质截留能力、机械强度和化学相容性上都具有优越的性能而被广泛使用。PVDF膜适用于化学发光(如ECL Star、ECL Plus、ECL等)、常规显色(如DAB、TMB)、染色、同位素等方法检测蛋白。常见的PVDF膜孔径有0.45μm和0.2μm两种，后者孔径小，对小分子蛋白有较好的拦截和吸附作用，背景可能会比前者微高。

PVDF膜是疏水性的且不带电荷，不能被常规的转膜液所浸润，所以需要在使用前进行预处理以浸润和活化。最常见的方法是使用剧毒的甲*浸润和活化PVDF膜，使PVDF膜中微孔内的空气被低表面张力的甲*所替代，从而易于后续水或者缓冲液进入PVDF膜中的微孔内，使PVDF膜从疏水性变成亲水性，此时白色的PVDF膜会变成半透明状。通常情况，浸润活化后的PVDF膜还需要在转膜液中适当平衡2-3次，以充分去除膜上的甲*并确保转膜时的均一性，才能用于后续的转膜等实验。

我公司的PVDF膜浸润活化液采用了优化的特殊配方，含有能产生特殊表面张力的无毒去垢剂，在确保安全无毒情况下，又能实现PVDF膜的快速浸润和活化，并且后续也极易被转膜液所平衡，是PVDF膜浸润活化的理想选择。

注意事项：
1. 本产品含有挥发性成分，使用完毕后请盖紧瓶盖，以防失效。
2. PVDF膜应使用镊子轻轻夹住边角，以免划痕损坏PVDF膜。
3. PVDF膜一经浸润和活化，需保持湿润，可放置于western转膜液或洗涤液中。如不慎被干燥，则需要重新浸润和活化。

储存条件：4℃，有效期一年。

名称：凝胶蛋白质蓝染试剂盒(考马斯亮蓝染色液和脱色液)
货号：ZN1892
规格：1盒
产品规格：
染色液 100ml
脱色液 400ml
产品保存：室温保存，一年有效。
产品说明：
此试剂盒是以考马斯亮蓝R250为染料，可用于 SDS-PAGE或非变性PAGE蛋白电泳胶的快速染色，或免疫印迹转膜后 PAGE 胶上残余蛋白的检测。可以检测到低达 10ng的蛋白电泳条带。
使用方法：
1．电泳结束后，取凝胶放入蒸馏水中,摇床摇动 5-10分钟,以去除盐及 SDS 等干扰物质。
2．弃蒸馏水，加入适量的染色液，以浸没凝胶为宜。 .
3．至摇床上缓慢摇动，室温染色一小时或更长时间。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，可以认为已染色充分。
4．倒出染色液(染色液一般可以重复利用 2-3次)，加入适量的蒸馏水洗涤凝胶。
5．加入脱色液，放在摇床上摇动，其间需更换脱色液,直至凝胶背景清楚为止。
注意：如若需加快脱色，可微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾(尽量避免沸腾，以免胶破裂)，立即停止加热，放置摇床上摇动数分钟(如若背景或条带不理想可更换脱色液并重复此步骤)，直到背景干净或条带清晰。
6．放入含有 20%甘油的水溶液中保存。
常见问题：
1.无染色条带或条带较弱，可能上样量少，建议跑电泳时加两个不同量的BSA的泳道作为阳性对照。
2.本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护。
3.背景太高：可能杂质没有除尽，建议延长洗涤时间或增加洗涤次数。

名称：AEC显色试剂盒(红色)
货号：ZN1963
规格：1盒
保存：频繁使用时置 4℃，不常使用时置-20℃。
有效期：一年。
3 氨9乙基卡唑(AEC)是过氧化物酶重要的显色剂之一。显色呈鲜艳的红色，可用于免疫组化及各种斑点检查法。AEC的缺点是溶于有机溶剂，须用水溶性封片剂封片。
试剂盒中内容：
显色剂 A：AEC×20倍浓缩液，3ml。
显色剂 B：×20倍醋酸盐浓缩缓冲液(含 H2O2，PH5.6)，3ml。
使用方法：
1．在过氧化物酶的检测完成以后，TBS或PBS 充分洗涤，一般 5分钟×4次。
2．按 1ml 蒸馏水加 1 滴显色剂Ａ和１滴显色剂Ｂ，混匀,加至标本上。一般避光显色 10-30分钟。若无背景出现则可继续显色。
3．蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时甲基蓝 3-5分钟或不含酒精的苏木素(Mayer"s)复染。
4．水溶性封片剂封片，也可简单地用甘油封片，显微镜观察。
注意事项：不得使用含酒精的苏木素复染。

名称：双显色免疫组化试剂盒(小鼠源IgM型一抗)(DyLight488和POD)
货号：ZN2935
规格：1ml|2ml|5ml
本试剂盒适于一抗来源为小鼠的IgM型抗体，是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。此免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 DyLight 488 与过氧化物酶(POD)标记的链酶亲和素（SABC-DyLight 488+POD）。DyLight 是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的抗淬灭性和特异性，对 pH 不敏感、分子较小渗透性好等优势。DyLight 488 最大吸收峰 493nm；最大发射峰 518nm。呈黄绿色。加入显色剂 DAB 显色后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。

试剂盒组成：

组分	规格
正常山羊血清封闭液(稀释比1:10)	1ml/2ml/5ml
生物素化山羊抗小鼠IgM(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-DyLight 488(参考效价1:200～800)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-POD(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml

另附有四个滴瓶可供稀释试剂用。

保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。

石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗，5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(小鼠 IgM)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化山羊抗小鼠 IgM，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加SABC-DyLight 488(参考效价1:200-800)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。

建议：
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954，与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。