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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
大量
- 靶点:
VRK1
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
Rabbit
- 抗体英文名:
Anti-VRK1
- 抗体名:
牛痘相关激酶1抗体(丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶VRK1)
- 标记物:
HRP,AKP
- 宿主:
人,鼠,猴,鸡,狗,猪等
- 适应物种:
Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
- 免疫原:
KLH conjugated synthetic peptide derived from human VRK1 (122-165aa)
- 亚型:
IgG
- 形态:
冻干或液体
- 应用范围:
WB,ELISA,ICC,IP等
- 浓度:
1mg/1ml
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
0.2ml/200μg
英文名称 Anti-VRK1
中文名称 牛痘相关激酶1抗体(丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶VRK1)
别 名 PCH1; Serine/threonine protein kinase VRK1; Serine/threonine-protein kinase VRK1; Vaccinia related kinase 1; Vaccinia virus B1R related kinase 1; Vaccinia-related kinase 1; VRK1; VRK1_HUMAN; MGC117401; MGC138280; MGC142070
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 细胞周期蛋白 转录调节因子 激酶和磷酸酶 表观遗传学
蛋白分子量 predicted molecular weight:45kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human VRK1 (122-165aa)
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
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FITC标记抗体流程:
(1)将待交联的蛋白(浓度31mg/ml)对交联反应液透析三次4 ℃,至pH=9.0。交联反应液配制方法:7.56g NaHCO3,1.06g Na2CO3,7.36g NaCl,加水定容至1 L。
(2) 将FITC溶于DMSO中,浓度为1mg/ml。每次交联使用的FITC均应新鲜配制,避光。
(3) 按P:F(蛋白质:FITC)=1mg:150μg 的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中,边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀,暗处4 ℃反应8 hr。
(4) 加入5mol/L的NH4Cl至终浓度50mmol/L, 4 ℃终止反应2 hr。
(5) 将交联物在PBS中透析四次以上,至透析液清亮。
(6) 交联物的鉴定:蛋白浓度(mg/ml) = [ A280– 0.31×A495 ] / 1.4F/P比例: 3.1×A495 / [A280 – 0.31×A495 ],该值应介于2.5 ~ 6.5之间。
(7) FITC交联的蛋白应置于pH7.4的磷酸盐缓冲液中,加入0.1% NaN3、1% BSA,4℃暗处保存。
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文献和实验生命活动与蛋白质的动态变化密切相关, 很多情况下某些蛋白质是通过各种翻译后修饰来完成或改变其功能。在数量众多的蛋白质翻译后修饰中,蛋白质磷酸化修饰无疑是最重要的一类,它是指通过蛋白激酶(Protein kinase,PK)介导的酶促反应把磷酸基团从一个化合物转移到另一个化合物上的过程[1](Figure 1所示),是生物体内存在的一种普遍的调节方式。现今发现的所有人类蛋白质中超过30%可被磷酸化修饰,这一修饰在细胞信号的传递过程中占有极其重要的地位,与生命活动的许多过程都密切相关,对此
1. 前言 蛋白质翻译后磷酸化修饰是影响真核细胞每一个细胞内活动过程的最丰富的细胞调节形式。一个蛋白质的磷酸化能引起结构、稳定性、酶活,与其他分子之间相互作用的能力或其亚细胞定位的改变。蛋白激酶催化可逆的蛋白质底物的磷酸化,作用在其丝氨 酸、苏氨酸和酪氨酸残基位点上。如在拟南芥中,丝氨酸/苏氨酸激酶占整个蛋白质组 的 4% [1] ,但对它们的生物学功能还不十分了解。因此,我们需要能开展蛋白激酶全球分析的高通量蛋白质组学方法[ 2,3] 来鉴定下游底物。 用于确定磷酸化共有
的作用。例如,组蛋白 H3N 端的磷酸化可能促进染色质在有丝分裂期间的凝集。在哺乳动物中,aurora B 是有丝分裂时 H3S10 磷酸化的激酶,但是在存在 aurora B 对 H3S10 的磷酸化是不够的。牛痘苗相关激酶 1 是哺乳动物 NHK1 的同系物,它能在体内和体外直接使组蛋白 H3T3 和 H3S10 磷酸化,而失去 VPK1 的活性,组蛋白 H3 的磷酸化也将减少。 组蛋白 H1 被细胞周期蛋白依赖的磷酸化是其翻译后主要的修饰作用。组蛋白 H1 的磷酸化能够影响 DNA 二级
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