HP-W-B404   植物中脂氧合酶 （LOX)测试盒 微

RNA介导的基因沉默

基因与它们各自的 IR 序列有 90% 同源性，且至少有 3 个 21 bp 区域完全与 IR 同源，目的基因稳定状态的 RNA 含量并不降低。这一发现证明，序列同源性不是决定 IR 序列是否能诱导目的基因 mRNA 降解的唯一因素，其他因子也能起作用。需要做更多的试验，以明确哪一种特征特性可用于模拟和预测植物中给定反向重复序列的沉默效应。2. 材料 2.1 RNA 干扰 2.1.1 发夹 RNA (hp- RNA) 载体的构建 ( 1 )  用聚合酶链反应（ PCR ) 扩增 300~600

三氯乙酸-丙酮法提取植物全蛋白

/L DTT、5 mmol/L 磷化氢、0.3% 两性电解质（ pharmalyte)   pH 3~10  ( V/V ) ，双蒸水配制。 ( 2 ) 溶液 B : 7 mol/L 尿素 、2 mol/L 硫脲、0.5% CHAPS  (m/V ) 、10 mmol/L DTT、5 mmol/L 磷化氢，双蒸水配制。4. 注释 ( 1 ) 蛋白质沉淀剂和重悬液在使用前必须预冷。始终将丙酮溶液放在 4℃ 条件下。 ( 2 ) UKS 和 R2D2 溶液中均含有较高浓度的尿素，需要

决定转基因表达的启动子序列

或者不表达 [ 图 11.1  (a ) 和图 11.1 (b ) ]。虽然玉米 Ubil 启动子具有很高水平的本底表达，但依然受热激和胁迫的诱导 [64]，而这种诱导性在大多数玉米 Ubil 启动子的转基因研究中并未被积极利用。玉米 Ubil 的热激元件已被鉴定，当采用豌豆凝集素启动子的一个碱性结构域/亮氨酸拉链因子结合位点替换 Ubil 的热激元件时，则会改变基因在种子内的表达分布，即表达由胚转向胚乳 [66]。其他一些泛素启动子在单子叶植物转化中也得到鉴定，包括从水稻中分离出的 RUBQ2