jetMESSENGER用于难转染细胞的mRNA转染试剂
jetMESSENGER®
简介
转换到mRNA,使基因表达进入新的水平
原代细胞,神经细胞,悬浮细胞和多种癌症细胞系特别难转染。通过高效mRNA转染 ,jetMESSENGER®在这些通常难转染的细胞中有着高转染效率。
mRNA转染同DNA转染一样简单,而且mRNA无需进入细胞核即可表达,也无需细胞分裂进行基因表达。因此,生长缓慢或有特殊机制来保护基因组的细胞终于也可以用来做基因表达了。
mRNA转染,释放细胞的全部潜能
说明
超越DNA转染的性能
jetMESSENGER® is a highly efficient and gentle mRNA transfection reagent. mRNA transfection presents many advantages versus DNA transfection:
jetMESSENGER®是一种高效、温和的mRNA转染试剂。mRNA转染比DNA转染的优势很明显。
- 无基因组整合风险,因而不会改变转染细胞的基因组
- 无启动子调控问题
- 无需到达细胞核即可有效表达
- 更柔和
jetMESSENGER®专用于在通常难转染的细胞中进行高效转染,几乎可在所有细胞类型中进行相关的基因表达实验(图. 1)
图 1. jetMESSENGER® 完胜DNA转染试剂。
在多种细胞系中转染EGFP mRNA(5meC, pseudo-uridine, Trilink™)或编码EGFP的质粒DNA 24小时后,FACS分析转染效率。实验条件参照操作手册推荐。
适用于各种细胞系
使用jetMESSENGER®,在各种细胞系:从贴壁和悬浮的癌症细胞,到敏感的原代细胞和神经细胞,均可以达到出色的转染效率 。jetMESSENGER®还完美适用于成纤维细胞和干细胞的重编程实验(表 1).
表1. jetMESSENGER®在各种细胞类型中均可产生高效转染。
操作简单
mRNA转染 同DNA转染一样简单:只要在缓冲液里稀释mRNA, 加入jetMESSENGER®,再把混合液加到含/不含血清的细胞培养基中即可(与抗生素兼容)(图 2).
图2. 简便的转染流程
对细胞极其温和
基因表达无需进入细胞核,jetMESSENGER®可以进行静止和缓慢分裂的细胞转染。另外,jetMESSENGER®操作流程极其温和。细胞活性在转染过程中保持良好,细胞形态也不会改变。 (图. 3)。使转染实验真正与生理相关。
图3. 相比DNA转染,jetMESSENGER®转染的细胞活性更好,蛋白表达更高。原代大鼠皮层神经细胞,HepG2和小鼠干细胞在转染48小时后用相差荧光显微镜分析。根据操作手册推荐,转染jetMESSENGER®/eGFP mRNA (5meC, pseudo-uridine, Trilink™) 和 L2K/eGFP质粒DNA 。
应用
mRNA转染
jetMESSENGER®特别适用于难转染的细胞,如神经细胞、干细胞和多种癌症细胞系的基因表达。(图.4)。
图.4. jetMESSENGER®-在各种难转染细胞中进行转染。转染48小时后,用荧光显微镜分析。根据操作手册推荐,转染jetMESSENGER®/eGFP mRNA (5meC, pseudo-uridine, Trilink™) 和 L2K/eGFP质粒DNA 。OVCAR-3, NCCIT, MDA-MB-231 & SW1353细胞系的数据由热心的Inserm U1199 « BioTICLA » (Caen, France)提供。
神经学应用
jetMESSENGER®在原代神经细胞产生高效转染,并在数天内维持细胞正常生理状态和形态,可用于在神经学应用中进行长期基因表达(图. 5.)。
图.5. jetMESSENGER®适用于原代大鼠皮层神经细胞中进行mRNA转染。转染48小时后,用明视野和荧光显微镜分析原代大鼠皮层神经细胞。 根据操作手册推荐,转染jetMESSENGER®/eGFP mRNA (5meC, pseudo-uridine, Trilink™) 和 L2K/eGFP质粒DNA。
CRISPR/Cas9应用
jetMESSENGER®完美适用于CRISPR/Cas9进行基于RNA的基因组编辑。
细胞重编程
jetMESSENGER®转染后的细胞可保持高活性和感兴趣蛋白的长期表达,因而是重编程研究中理想的转染试剂。可以把身体的任意细胞转变成诱导多功能干细胞。例如,用jetMESSENGER®的mRNA转染可以将纤维细胞转换成IPs。
图.6. jetMESSENGER®适用于在BJ细胞(人成纤维细胞)转染mRNA。在转染48小时后,用明视野和荧光显微镜分析BJ细胞。 根据操作手册推荐,转染jetMESSENGER®/eGFP mRNA (5meC, pseudo-uridine, Trilink™) 和 L2K/eGFP质粒DNA。
免疫治疗应用
jetMESSENGER®可高效转染肿瘤和免疫细胞,带来更多的肿瘤和免疫治疗应用。
客户评价
“在多种来源的人的肿瘤细胞中的RNA转染中,jetMESSENGER是非常有效的试剂。 对比常规的DNA转染试剂,它强烈的表达水平和转染细胞的比例非常令人印象深刻,且没有任何的细胞毒性迹象。”
Brotin E., Abeilard. E, Denoyelle C., Poulain L. Inserm U1199 « BioTICLA », Caen, France
品质
每批次jetMESSENGER® mRNA转染试剂均经过实验室测试:用带GFP表达的mRNA 在CaCo-2细胞中进行mRNA转染,且每瓶试剂都附带分析证书。
A video presenting mRNA transfection for hard to transfect cells is available