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上海笃玛生物科技有限公司
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100ml/500ml
常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。
Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白;其纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小,且较容易分离和纯化,是目前使用最广泛的一种。
GST标签体系具有蛋白表达率高,表达产物纯化方便,利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。
GFP或其突变体EGFP等广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP抗体不经可以检测GFP或其适当的突变体,也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。
Myc标签(序列为:EQKLISEEDL)已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。
HA标签系统利用一个HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛运用。
MBP标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。
其余标签抗体还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等,但应用相对较少。
EDTA抗凝羊血
胎牛血清,小牛血清和新生牛血清三种之间的区别:
这三种血清的成份,总体没有什么明显差别,只是有一些成分与其生存环境有关,如上述有人说的抗体等很少。此外,因生长发育的需要,有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定,胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。
胎牛本身生活在一个洁净环境当中,其血清与外界隔绝,只要生产工艺科学规范,其质量肯定要新生牛和小牛要好。
血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。
胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
EDTA抗凝羊血
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文献和实验人 Neuritin 酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本 中Neuritin 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 Neuritin 水平。用纯化的 Neuritin 抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入 Neuritin ,再与 HRP 标记的 Neuritin 抗体结合,形成抗体
终止液 (Stop Solution ) 12ml 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。 2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 1 0ng
) 12ml 终止液 (Stop Solution ) 12ml 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。 正常标本测定前用 标本 稀释
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