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- 2025年11月06日
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99
- 英文名：
HiSpeed Plasmid Maxi Kit
- 保质期：
已收到实际货物为准
- 供应商：
北京诺博莱德科技有限公司
- 保存条件：
已收到实际货物为准
超快速纯化至多750 µg转染级纯质粒或柯斯质粒DNA
- 少于60分钟制备时间
- 无需离心即可澄清裂解液并进行异丙醇沉淀
- 在沉淀过程中不会损失DNA
- 可纯化至多750 µg高拷贝质粒DNA
- 使用LyseBlue，获得最佳的裂解效果和最大的DNA产量
HiSpeed Plasmid Kits使用阴离子交换技术，超快速、大规模纯化得到质粒DNA，无需离心。得到的DNA相当于两次CsCl梯度离心处理得到的纯度，适合转染级纯度的应用。
HiSpeed Plasmid Kits提供QIAfilter Cartridges、HiSpeed Tips和QIAprecipitator模块，用于快速、大规模的制备质粒，无需真空底座。针筒规格的QIAfilter和QIAprecipitator模块取代了传统阴离子交换过程中的离心操作，质粒纯化更加方便、快捷。可从150–250 ml或50 µl – 150 ml的培养体积中纯化多至750 µg（Maxi）、或200 µg（Midi）的高拷贝质粒DNA（培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基）。HiSpeed Tip支持高流速，确保更快地完成DNA结合、洗涤和洗脱。
此外，HiSpeed tips中新型的阴离子交换树脂广泛用于核酸的纯化。其独特的分离特性使得到的DNA的纯度相当于两次氯化铯梯度离心处理得到的纯度。
Principle
QIAfilter Cartridges（参见"QIAfilter Cartridge"）是一种特制的过滤器，专用于取代细菌细胞碱裂解之后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可去除SDS沉淀，只需很短的离心时间即可澄清细菌裂解液。预装的HiSpeed tips依靠重力流运行，确保不会流干，减少了质粒制备的手工操作时间。
独特的QIAprecipitator模块（参见"QIAprecipitator module"）取代了异丙醇沉淀后传统的离心法纯化DNA。异丙醇混合液流过QIAprecipitator的时候DNA会结合上去，然后用TE缓冲液或水将DNA从QIAprecipitator洗脱下来。这一独特的模块降低了离心后转移上清液过程丢失DNA的风险。
Procedure
经中和的细菌裂解液放入QIAfilter Cartridge中，几秒内过滤澄清。滤出液放至HiSpeed tip进行质粒DNA 纯化（参见"QIAGEN Plasmid Kit procedures"）。 洗脱所得DNA与异丙醇混合并用注射器装入QIAprecipitator中。经浓缩和脱盐后，直接从QIAprecipitator上用TE缓冲液或水洗脱DNA。
Applications
HiSpeed Plasmid Kits纯化得到超纯转染级纯DNA，适合于多种应用，包括：克隆、测序、转染和质粒介导的基因沉默等。
| Features | Specifications |
| 应用 | Transfection, cloning, sequencing, gene silencing |
| 起始样本体积 | 150 µl – 250 ml culture volume |
| 质粒类型 | High-copy, cosmid DNA |
| 处理 | Manual (filtration) |
| 每次处理样本量；通量 | 1 sample per run |
| 技术 | Anion-exchange technology |
| 每次运行时间或处理样本数 | <60 min |
| 产量 | <750 µg |
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文献和实验QIAGEN Plasmid plus Kit——超快纯化多至10 mg转染级别纯质粒
♦利用真空方式超快速进行质粒纯化，碱裂解步骤后，利用QIAfilter无须离心即可澄清裂解液，然后离心柱安置于真空底座（例如：QIAvac 24 Plus 见图1）上进行DNA的洗涤和洗脱。Midi and Maxi kit 20 分钟内可纯化24 个样本Mega和Giga Kit可分别在40，50分钟内处理12个样本。 ♦QIAGEN Plasmid plus Midi/Maxi Kit 提供优化的高产量protocol 并采取高洗脱体积，确保纯化得到高产量质粒
Materials For purifying plasmid DNA from Escherichia coli cells, the Qiagen Spin Miniprep Kit produces quite reliable results. Do not autoclave solutions containing isopropanol or MOPS; use sterile filtration if necessary.
Large Scale Plasmid Preps: Qiagen/Cesium Method
: Qiagen Maxi Prep kit TE, pH8 Cesium Chloride CsCl/TE solution (d = 1.55 g/mL) 30 gm CsCl + 33 mL TE, check density Ethidium bromide 1 mg/mL Absolute ethanol 70% ethanol 3M NaOAc
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